农杆菌介导的双价抗盐基因转化番茄的研究.pdfVIP

中国农业科学 2005:38(8):1636-1644 Scientia Agricultura Sinica 农杆菌介导的双价抗盐基因转化番茄的研究 1,2 1 1 1 1 刘 晶 ，周树峰 ，陈 华 ，韩和平 ，李银心 1 2 （中国科学院植物研究所光合作用与环境分子生理学重点实验室，北京 100093； 中国科学院研究生院，北京 100039 ） 摘要：植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状，将多个耐盐相关基因导入同一植物更有助于提高植物的 耐盐能力。运用农杆菌介导法向转 + + AtNHX1（拟南芥Na/H 逆向运输蛋白编码基因）的番茄（Lycopersicum esculentum L. Moneymaker’）株系X1OEA1自交二代植株（T2）中转入山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因（BADH ）。PCR、Southern、 RT-PCR和甜菜碱含量分析结果表明，BADH 已经整合到番茄基因组中，并在转基因植株中转录和翻译表达。叶绿素 荧光（Fv/Fm）、相对电导率（Rc/Rc’）、叶绿素含量（Chla+b）、叶绿素a/b比（Chla/b）、光合速率（Pn）测定结 果表明，200 mmol·L-1 NaCl 胁迫下，双转化的番茄植株各项生理指标均优于单转化 AtNHX1 的番茄。转双基因植 株TT0-2随着NaCl浓度的增加，Fv/Fm值下降幅度最小；相对电导率与非胁迫条件下相比增加了3.6 倍，而单转 化 AtNHX1 的T2增加了4.2倍；与转单基因植株T2相比，茎部干重、鲜重分别增加12.5％、19.8％；叶部干重、 鲜重分别增加22.5％、14.0％，差异达显著水平。初步证明双基因转化有助于增强番茄的耐盐性。同时对番茄的 转化系统进行优化的结果表明，使用抗生素特美汀的转化效率明显高于头孢霉素的。 关键词：农杆菌；BADH；AtNHX1；双基因转化；耐盐性；番茄 Agrobacterium Mediated Transformation of BADH to the AtNHX1 Transgenic Tomato (Lycopersicum esculentum L. ‘Moneymaker’) 1,2 1 1 1 1 LIU Jing , ZHOU Shu-feng , CHEN Hua , HAN He-ping , LI Yin-xin 1 （Key Laboratory of Phytosynthesis and Environmental Molecular Physiology, Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100093; 2 The Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039 ） Abstract: To evaluate the effects of combined salt tolerant mechanisms, BA