分离DNA的琼脂糖凝胶电泳技术.pdfVIP

2012年第 12期 化 学 教 育 分离DNA的琼脂糖凝胶 电泳技术 尹海权 王明召 (北京师范大学化学学院 100875) 摘要 介绍在现代生物学中十分重要的琼脂糖凝胶电泳技术的化学原理，涉及胶体电泳、琼 脂糖凝胶的多级结构、DNA分子结构和粒子的电荷作用等化学和生物学基础知识，旨在为高中教 育提供一级学科层面的知识联系，供一线高中化学教师和生物学教师用于教学实践。 关键词 高中化学 琼脂糖凝胶 电泳 DNA分离 2010年， 《科学》杂志上发表了一篇题为 “创 Tiselius教授于 1937年建立了 “移动界面电泳” 造一个 由化学合成基因组所控制的细菌细胞”的研 方法，并用该法首次将血清蛋 白质的几个组分成功 究论文_l1]。美国作者JCVenter等人希望通过化学 地分离开来，他因此获得 1948年诺贝尔化学奖 ]。 合成的方法合成一个完整的基因组，并将这个基因 后来发展起来可以减少外界干扰的区带电泳技术， 组导入到一个已去除基因的细胞中，让该合成基因 这是一种用固体作支持介质的电泳技术，待分离物 组来控制细胞而形成一个可以正常存活并 自我复制 质通过在支持介质中移动而得以分离成若干区带。 的新细胞，从而得到一个完全 由人类设计、合成、 如果用琼脂糖凝胶作支持介质，这种区带电泳技术 组装、移植的生命体——人造生命。在某种意义上 则称为琼脂糖凝胶 电泳l3“]。在电场作用下，DNA 可以认为该新细胞是一种人类创造的新生物，因而 和RNA之类生物大分子可在琼脂糖凝胶中运动。 这项研究得到了学术界及社会 的极大关注 。 由于分子泳动速率与分子大小和分子构型有关，因 ∞∞∞ ∞ ∞ 在该研究中，研究者按照 自然界存在的野生型 而可将不同大小的分子，或分子大小相同但构型不 Ⅲ L=一■一一 一～一一 DNA核苷酸序列，人工合成了一条DNA。这个人 同的分子分离开来。琼脂糖凝胶 电泳技术在当代已 工合成得到的DNA分子是否就是想要的DNA分 经成为一种极其重要的分析手段，广泛应用于生物 … 子?需要将它与野生型 DNA进行比较来验证。图 化学、分子生物学、医学、药学、食品、农业、卫 1是该研究的一个琼脂糖凝胶电泳实验结果，图中 生及环保等许多领域。 遮 的黑色条带对应不同分子量的DNA片段，每一列 条带就是一个环状DNA分子经过限制性内切酶剪 O 切后得到的DNA片段。以符号 I表示的是一种标 准物，它起到标尺 的作用 。以符号 WT表示的是 野生型DNA分子，而以符号235表示的就是化学 合成的DNA分子。电泳结果证明化学合成 DNA 注 ：bp代表 DNA分子所含碱基对 分子与野生型DNA分子完全相同，说明这项研究 图 1 分子质量不同的DNA分子的电泳分离结果照片[1] 的重要步骤——DNA 的合成和组装获得成功。在 2 什么是琼脂糖凝胶 这个开创性研究中，琼脂糖