冷冻保存对人卵母细胞的影响-知识词典.pdfVIP

现代妇产科进展 2005年 l】月第 l4卷第 6期 ProgObstetGynecol，Nov．2005，Vo1．14，No．6 · 综述 · 冷冻保存对人卵母细胞的影响 刘军霞 综述，黄国宁 ，王亚平 审校 (1．重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，重庆400016；2．重庆市妇产科医院生殖遗传研究所) 【摘要】 卵母细胞冷冻解冻后因存活率低、受精率低、胚胎发育能力差等，影响了它在辅助生殖医 学中的应用。卵母细胞在冷冻过程 中由于受到温度改变、渗透压改变、冷冻保护荆作用、冰晶形成等影 响，可能会出现纺锤体分布和结构异常，染色体非整倍体和多倍体发生，透明带硬化 ，线粒体变化 ，细胞 膜破裂等。研究并解决上述问题有助于提高卵母细胞冷冻技术。 【关键词】：低温保存 ；卵母细胞；综述文献 中图分类号：R714．13 文献标识码 ：A 文章编号：1004—7379(2005)06—0502—03 卵母细胞冷冻提供了一种可以避免胚胎冷冻引起的伦 性 ，0~C后 lmin内纺锤体没有明显改变 ，2—3min纺锤体缩 理争议或法律限制的选择 。卵母细胞冷冻技术对于可能 短 、极性消失，4～9min上述变化更明显，10min后纺锤体全 因手术 、放射线治疗 、化学治疗失去卵巢功能的患者，以及 目 部消失。提示冷冻卵母细胞时应使卵母细胞暴露在0~C的 前不适宜怀孕的妇女保留生育能力，少数情况下取卵手术当 时间不超过 lmin。 日取精失败的患者为避免放弃治疗周期 ，以及卵母细胞捐赠 由于未成熟卵母细胞在生发泡期(germinalvesicle，GV) 都需要应用卵母细胞冷冻技术 。自1986年 Chen 首次 没有微管分布，所以冷冻过程不会对纺锤体造成影响，此时 报道冻融人卵母细胞妊娠成功后 ，随后的十几年卵母细胞冷 卵母细胞对冷冻损伤的敏感度较低 ，但文献就冷冻过程中对 冻技术进展缓慢。卵母细胞作为人体内最大的细胞，具有单 经过体外成熟后的卵母细胞纺锤体与染色体结构的影响报 倍体特性、细胞表面积相对小等特征，冷冻、解冻过程中强烈 道不一，需要进一步研究 。冷冻保存GV期卵母细胞，体 的温度变化 、冰品的形成、渗透压的变化 、高浓度冷冻保护剂 外成熟后行卵细胞浆 内单精子注射 (intracytoplasmicspemr 等使卵母细胞极易受到损伤 ，现细胞内结构的变化 ，所以， injection，ICSI)已有出生婴儿的报道。目前 由于卵母细胞体 目前卯母细胞冷冻仍存在复苏率低 、受精率低 、胚胎发育能 外成熟技术尚不成熟 ，冷冻保存 GV期未成熟卵母细胞的有 力差等问题。研究并解决这些问题有助于改善卵母细胞冷 效性尚待进一步证实。 冻的成功率，用于不孕症的治疗或生育能力的维持。 1．2 冷冻保护剂对纺锤体的影响 卵母细胞暴露于冷冻保 l 冷冻对纺锤体的影响 护剂时由于渗透压的影响可导致细胞体积改变，冷冻保护剂 纺锤体是由细胞两极的中心粒 、赤道板、以及将 中心粒 类型、浓度 、温度的改变会影响细胞体积改变的程度。细胞 和染色体连接起来的微管组成 ，它影响卵母细胞中染色体排 降温前暴露在冷冻剂期间即使很小的改变也可引起细胞内 列 、分离和极体排放。减数分裂纺锤体只是微管的一个暂时 水化作用的巨大改变 。这些因素可能影响冷冻后卵母细 的动力学结构。它由仅、p微管蛋白杂环不断的装配组成。 胞的发育潜能。卵母细胞冷冻 目前常使用的渗透性保护剂 微管蛋白对温度变化 、渗透压变化、冷冻保护剂暴露高度敏 为 l，2丙二醇 (1，2-propanediol，PROH)，非渗透性保护剂为 感 ，可造成微管蛋白的解聚和微管分解。 蔗糖。Fabbri报道 ，提高蔗糖浓度增加 了卵母细胞的脱 1．1 温度改变对纺锤体的影响 通过偏振光显微镜、激光 水