利用枯草杆菌降低甘油发酵原液中残糖浓度的研究.pdfVIP

药 　物 　生 　物 　技 　术 106 Pharmaceutical Biotechnology 　2000 ,7 (2) :106～108 文章编号 :100589 15 (2000) 020 10603 利用枯草杆菌降低甘油发酵原液中残糖浓度的研究 倪孟祥 　沈 　颖1 ( 中国药科大学微生物制药教研室 ,南京 2 10009 ;1 宜兴市人民医院 ,江苏宜兴 2 14200) 　　摘 　要 　甘油发酵原液中的残糖浓度高达 30 %～50 % ,给后提取工作造成很大的困难 。利用一株枯草 杆菌 6633 1 ,进行甘油发酵原液的二次发酵 ,使得残糖浓度 降至 10 % 以下 ,且甘油含量基本不变 ,有利于下一 步的提取精制 。 关键词 　甘油 ;枯草杆菌 ;残糖浓度 ;二次发酵 ( ) 　　甘油 丙三醇 ,是现代国防工业和民用工业的 15 　氮含量的测定 重要原料 , 目前被广泛应用于医药 、炸药 、塑料 、橡 用凯氏定氮法进行[6 ] 。 胶 、食品和化妆品等方面 。近几年来已试验成功的 16 　残糖含量的测定 利用耐高渗压酵母菌发酵生产甘油技术[ 1 ] ,是 目前 按菲林试剂法进行[7 ] 。 发酵法中产生甘油含量最高的方法 。但是 ,在生产 17 　发酵原液直接进行二次发酵 过程中[2 ,3 ] ,发酵原液经蒸发浓缩处理时 , 由于其 取已活化的试验菌 ,移种到普通琼脂斜面培养 ( ) 中的残糖浓度过高 30 %～50 % ,易导致蒸发过 基上 ,37°C ,培养 16h ,在每支斜面上加入 5ml 无菌 程中残糖的焦化 ,发生结垢 、粘壁等现象 ,而且一部 生理盐水 ,用铲刀刮下菌苔 ,倾倒入已分装 50ml 发 ( ) 分甘油被包埋在壁垢中 ,给生产操作和产品提取带 酵原液的三角瓶 500ml 中 ,上摇床 ,250 r/ min ,37° 来很大的困难 。现在尚未有利用微生物进行二次 C 培养 。分别在 12h , 16h ,20h ……,40h ,44h ,48h , 发酵处理甘油发酵液中残糖的文献报道 。本试验 取二次发酵液 ,经 4000 r/ min 离心 15min ,取上清 ( 利用一株筛选到的枯草杆菌 6633 1 菌株 B acil l us 液分析测定残糖含量 、氮含量 、甘油含量 。 s ubt il is 6633 1) ,对发酵原液进行二次发酵 ,在维持 18 　发酵原液改变 p H 值二次发酵 甘油含量基本不变的情况下 ,降低了发酵液中的残 将发酵原液原p H 值 4 1 用 02mol/ L 氢氧化 糖浓度 。 钠溶液调节至 p H50 ,60 ,74 ,80 ,90 ,发酵仍按 17 中步骤进行 。 1 　材料和方法 19 　发酵原液改变含氮量二次发酵 11 　发酵原液 将发酵 原液 原含氮 量 02 1 % 调 至