发根农杆菌Ri质粒rol基因研究的综述ReviewofStudiesonRolGenesofRiPlasmidsfromAgroba.pdfVIP

遗传 HEREDITAS(Beijing)19(6):45一481997 发根农杆菌Ri质粒 ：of基因研究的综述① 周跃钢 王三根 西（南农业大学生理生化教研室，重庆400716) ReviewofStudiesonRolGenesofRiPlasmidsfrom Rgrobacteriumrhizogenes ZhouYuegang WangSangen (DepartmentofPhysiologyandBiochemistry,SouthwestAgriculturalUniversity,Chongqing400716) Ri质粒是不同于Ti质粒，仅存在于发根农杆菌中的另一类可作为植物基因工程载体的质粒，其上的 T-DNA片段可以整合进人被发根农杆菌侵染的双子叶植物细胞的核基因组中，并稳定地遗传下去，产生的表型 为植株发根瘤和再生转基因植株形态和发育异常。控制毛根形成的是T-DNA上的rol基因，rol基因不存在于 Ti质粒中。通过采用体外培养方法可以从毛根获得再生的转基因植株 （’·2) 1r01基因研究的意义 Ri质粒具有如下优点：(1)不含of二基因，对植株再生无影响，操作起来比Ti质粒更方便；(2)具有诱导毛根 形成的特点，并且诱导产生的每条毛根都只起源于一个细胞，因而在对从诱导产生的毛根获得的再生植株进行筛选 时，操作更方便．rol基因控制毛根的形成，故在Ri质粒的研究中极受重视。对rol基因的研究一方面可以了解诱 导毛根形成以及再生的转基因植株异常表型产生的机理，为在植物基因工程中正确应用Ri质粒提供依据；另一方 面，有可能弄清长期以来一直模糊不清的植物生长素的作用机理，因为含，of基因的转基因烟草原生质体对生长素 表现出异常的高度敏感性，这为研究生长素作用机理提供了一个较理想的实验体系 ’〔、2，。 2r01基因研究的现状 2.1rol基因的位点 目前已知的Ri质粒有农杆碱 a（gropine）型、甘露碱m（annopine）型、黄瓜碱c（ucumopine)型和米奇矛品 (mikimopine)型 ’〔、”。农杆碱型的T-DNA分为TL-DNA和TR-DNA两个区域，两区域之间为一个非插人的 DNA区，其余3型Ri质粒的T-DNA为连续的。已发现在农杆碱型Ri质粒的丁L-DNA上分布有4个r］ol基因 位点，分别命名为roIA基因、roIB基因、ro1C基因和roID基因。现已证实了rolA基因、rolB基因和rolc基因 在农杆碱型、甘露碱型和米奇矛品型Ri质粒中均存在，它们的部分特征如表1所示2,〔”。 表13种类型Ri质粒的，.0lA,B,C基因的部分特征a（s：产物氨基酸） 农杆碱型 米奇矛品型 甘露碱型 rol基因 大小b（p) as个数 大小b（p) aa个数 大小b（p) as个数 rolA 300 100 279 93 423 141 rolB 777 259 786 262 762 254 rolC 540 180 540 180 534 178 ①国家自然科学基金和农业部 “九五”重点项目资助的课题． 46 遗 传 HEREDITAS(Beijing)1997 19卷 2.2rolB基因 2.2.1roB基因表达的表型特征 roB基因表达引起转基因植株形成大量毛根，根表现出生长快速、高度分叉、斜向生长的特点。此外，roB 基因表达还可引起愈伤组织中出现细胞坏死和幼嫩植株的叶片上出现枯斑。在诱导毛根形成的rol基因中，ro思 基因是最重要的，在胡萝 卜、烟草和高凉菜属K（alarzchoe）中均可单独诱导毛根的形成