三江源高寒草甸土固氮基因(nifH)的多样性和系统发育研究.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 %’ (! - (# 年 月 #$$ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ )*+,’ #$$ !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 三江源高寒草甸土固氮基因（ ）的多样性和系统发育研究 -. / ， ， . # . # # . . 张于光 王慧敏 李迪强 肖启明 刘学端 . （湖南农业大学生物安全科技学院 长沙 !.$.#6） # （中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 北京 .$$$9.） 摘 要：首次利用KLM8M3NK 和测序分析对位于青藏高原腹地的青海三江源保护区高寒草甸土壤微生物固氮基因 （ ）的多样性和系统发育进行了探讨。在 个样地中，共得到 个阳性克隆，用限制性内切酶 和 进 !# $ # .!J %’ ! () ! 行 分析后得到 个不同的 谱带型，多样性为 ，其中 样品中获得 个阳性克隆和 个不同的 M3NK J M3NK #! O P QR 6# #. 谱带型，多样性为 ，而 样品中获得 个阳性克隆和 个不同的 谱带型，多样性为 ， M3NK # O7 P ST 7. .9 M3NK J.O .P # 个样地中有 个相同的 谱带型。在各样地都发现一个明显的优势种群， 样地的明显优势种群占克隆数的 M3NK QR ， 的优势种群占克隆数的 。对 个克隆进行了部分序列的测定，序列的相似性在 之 #9 OJP ST J# O6P #. D.P U 96P 间，在V1C/4CW 数据库中没有发现完全匹配的序列，因此这些序列可能代表着新的固氮生物株系。最后利用L’F@4’ 与 软件和已有序列构建了系统发育树，结果发现， 个序列分为 个不同的簇，大部分的克隆与 X Y1G4 #. ! *+,-.,/)01 -.+) 的 个系统发育亚簇（、和 ）具有较高的相似性，其中主要的序列都落在第一和第二簇内。 样地中的优 J # $ ST 势种群与 中的 具有较高的相似性，而 样地中的优势种群则与