慢性间断低氧加重PCOS大鼠脂肪组织胰岛素抵抗程度地研究.pdfVIP

2009’北京医学会呼吸系病专业学术年会文集 慢性间断低氧加重PCOS大鼠脂肪组织 胰岛素抵抗程度的研究 陈琳何权瀛 北京大学人民医院100044 ovary sleep 多囊卵巢综合征(polyeystie 多发于年轻的绝经期前女性，而OSA则多见于中年男性肥胖人群。近两年来的流行病学调查研 etal， 究却发现这两种疾病关系密切，肥胖的PCOS患者中OSA的患病率高达69．3％(Tasali 男性肥胖患者OSA的患病率。何种原因导致这两种疾病密切相关的? 多囊卵巢综合症以高雄激素血症和胰岛素抵抗为特征。雄激素水平过高能降低呼吸中枢控 制能力并导致睡眠中维持上气道扩张机制异常，而且内脏型肥胖可以引起前炎症因子分泌过多 和外周胰岛素抵抗。PCOS中的这些病理性改变可能都参与了OSA的高患病率。从另一方面来 看，阻塞性睡眠呼吸暂停一旦发生，反复间歇低氧导致白天嗜睡、夜间睡眠质量下降后都能引 激素紊乱。因此胰岛素抵抗导致的糖代谢异常可能是联系这两种疾病的关键点。 腹腔内白色脂肪组织(white tissue，WAT)不仅是简单的储能器官，可以通过分泌 adipose 多种细胞因子密切参与体内代谢。而PCOS和OSA多数患者都具有中心型肥胖特征，即腹腔内 脂肪聚集过多。WAT过多和功能异常可能参与了这两种疾病的发生发展。从微观来看，脂肪组 织细胞膜上的葡萄糖转运体是组织细胞代谢利用糖的最后限速步骤，其转运成功率与否直接决 定外周葡萄糖分布情况。因此我们将脂肪组织上的葡萄糖转运体作为主要观察指标，研究其在 PCOS和反复间歇低氧大鼠模型中的变化，结合整体水平的钳夹试验结果综合分析其糖代谢异 常的改变原因。 为此，本实验通过建立PCOS和反复间歇低氧两种动物模型，验证间歇低氧是否加重PCOS 的糖代谢紊乱，并在此基础上研究脂肪组织细胞膜上葡萄糖转运体的变化，探讨糖代谢紊乱和 胰岛素抵抗在这两种疾病中的作用，深入研究间歇低氧对PCOS机体内脂肪组织糖摄取利用情 况的改变，为临床更好的认识这两种疾病和选择性给予有效的早期干预方式提供思路。 材料与方法 一、实验动物： 、 由进食、水，维持12h／12h正常昼夜节律，保持适宜的温度和湿度。 二、主要仪器与试剂： ·46。 2009’北京医学会呼吸系病专业学术年会文集 (一)所用的主要仪器 反复间断低氧氧舱、持续低氧氧舱、正常氧舱：哈尔滨工业大学机械研究所设计福建省厦 瑞典，IKB。LD5—2A离心机：中国，北京医用离心机厂。UV-VISTV一1800双波长分光光度 IOOCX．II型透射电子显微镜：日本电子公司。722光栅分光光度计：上海第二分析仪器厂。 400R低温高速离心机：德国Heraeus公司。 Labofuge (二)主要试剂 江西金海棠药用油有限公司。胰岛素、雌二醇、睾酮酶免试剂盒：北方生物技术有限公司。OCT 包埋剂：美国SakuraFmemk公司。DAB试剂盒：北京中山生物技术有限公司。sP免疫组化检 Cruz公司。 测试剂盒：北京中山生物技术有限公司。辣根过氧化物酶标记兔抗羊垮G：美国Santa CrazBioteeh Inc，CA，美国。 5个PCR引物由上海生工合成，序列如下： (扎UTl：(f)5’．CG贼TT盯GGGltITCTCCAAA (r)5’．GACACCTCCCCCACA：rACArG GI，I兀’2：(f)5’．TGGGTrCCTTCCAGTrCG (r)5’-AGGCGTCTGGH’GTCGTAllG GLⅥ3：(f)5’．TGAAGCCATGAGCrrrGTCTGT