DMSO对PCR扩增反应的影响.pdfVIP

昆 明 医 学 院 学 报 ，（）： !# # $$ % $ ’( )* + #,- . /0123450 6789:1; 7 =8:45: ?32501; ’7;;33 @?AB 对 C’. 扩增反应的影响! !） ） ） 徐 葵 ，邱志明 ，汪晓英 ， （）昆明医学院药学系； ）生化教研室，昆明 ） ! #$%%! 摘要：为解决扩增 ’ 受体基因屡次失败的问题，观察了在 ()* 体系加入不同浓度 +,-. 时对 +/0 扩增 ! 反应的影响1 结果表明：一定浓度的 +,-. 可显著提高 ()* 扩增的特异性和扩增效率1 关键词：+,-.；()*； ’ 受体基因 ! 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） *23 0 !%% ’ 34%# %%! %! ’ %%44 ’ % ［］ 聚合酶链反应 （ ）技术 以其特异性强、 解得到基因组 ! ()* +/0 1 灵敏度高、简便快捷等特点使痕量乃至单一拷贝 #D! ()* 反应体系 的 +/0 能够在体外 个多小时内得以成百万倍的 试剂：!% ?@AABC， 77DE F/(，$ 77DE ,:G 复制，为病源体检测、遗传病诊断、法医物证分 )E ，FFH .，$ IJ K LM 酶均为 (CD7B:L 公司产 析、考古学探索、分子克隆等研究领域提供足够 品；正向及反 向引物 自行设计 由 (CD7B:L 公司合 量的靶 +/0 1 成；+,-. 为 -8:7L 公司产品1 在实际操作中，如直接采用基因组 +/0 为模 扩增条件：$% K 反应体系中含模板 +/0 % N 板，对许多靶基因来说，通常是在进入 ()* 循环 :，,:)E K，F/( $ K，引物各 K，LM 酶 ! 之前，将反应管置 23 5 2#6 $ 789，使基因组 +/0 ， 各管加入量不一，从 （ ）到 K +,-. % N$ K !O 热变性，靶基因的双螺旋结构打开1 此时，只要 （ ），用 补足 先于 !% N$ K !O FFH . $% K 1 2$6