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维普资讯 s口一 ； 上) 50(总37O) 《基础区学与临床》l99z年 第12卷 第 6期 一 株人胰腺癌细胞系的建立及其特性 崔金才 陈 杰√顾长芳 李德春 刘彤华 7多．，口 (北京协和医院病理科 ，北京，100730) 摘要 ：人随躲癌是很难建系的癌细胞之一 ，特剐是从原发瘸建立的细胞系。我们成功地从一 个胰腺癌组织建立了一株，胰腺瘸细胞系 ，命名为PC一3。PC-3细胞呈上皮样，鼬壁生长 ，羟 过 四年连臻培养 ，细胞系稳定 通过免疫组化 ，I乜镜观察 染色体及DNA含量分析 ，细胞集落形 成及裸鼠移植 ，生长因子对瘤细胞生长的影响和癌基因的表达证实Pc一3细胞系为人胰腺癌细肛 系．PC一3细胞系的建立进一步丰富了人胰腺癌细胞库，对深^了解人胰腺癌细胞生物学及分子 生物学特性提供了有力韵物质基础。 关键词：人旗隙瘙 塑壁至 翌 篓塑 服 糯 人胰腺癌是很难体外建系的。文献报道 成单层后，冲洗、乙醇 固定后，用兔抗人血 已建立胰腺癌细胞系约20余株 (1)。这些已建 清CEA (1：300DAKO)及免抗人角蛋 白 的人胰腺癌细胞系中多数是从转移癌，裸 鼠 (1：300DAKO)染色 (PAP法)，DAB 移植瘤或腹水瘤细胞建立的，仅有少数几株 显色 。电镜研究；熘细胞常规超薄切片 ，透 直接从胰腺癌原发赠建立的细胞系。我们成 射 电镜观察 功地从一人胰腺癌原发瘤建立了一株人胰腺 裸 鼠移植；以每 只 1X10PC一3细 胞 癌细胞系，并对其生物学特性进行了研究。 接种于4只Bab／C裸鼠前背部皮下(4J。每周 观察测量肿瘤大小，1l周处死裸 鼠，解剖裸 材 料 与 方 法 鼠，检查肿瘤生长 、浸润及转移情况 ，肿痛 细胞培养：肿瘤取 ij一57岁女性胰头 扣 及组织块，常规固定，切片及染色。 分化腺癌，取胰腺癌瘤组织常规冲洗后，』】j『 生长 因子对肿瘤细胞生长的影 响：将瘤 含10 小牛血清的RPMI1640培养液冲洗 2 细胞消化 、离心后，调整细胞数为 4×】O ／ ～ 3次，将癌组织 用 手 术 刀 切 碎 ，置 于 ml，悬浮在无血清 培 养 液 (RPMI16．~0培 37。C，5。，，二氧化碳培养箱中。培养所用 培 养液加地塞米松10nmol，ji琏岛索i0 g／m1， 养基为RPMIi6,10 (Gibco)含 15％小牛血 转铁蛋 白10g,／rnl，硒10ng／ml， 脯氨酸10 清 ，青 、链霉素及Hepes。 nmol／m1)中。接种在24孔板 内，每孔 1， 有关细胞生长 曲线和群体倍增时间，细 加不同浓度的蛙皮索(Boehringer，德 斟) 胞分裂指数，流式细胞仪测定细 胞 周 期及 10rimol~tl1000nmol／ml，或表皮生长 因于 DNA含量，染色体检查， 支 原体 污 染 检 10ng／ml，或抗表皮生长因子受体抗体50 g 测，软琼脂中集落形 成 参 照文 献 方 法 检 ／ral至 2gg／ml(CollaborativeReseach 测 2【，3]。