Beclin1和LC3在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义.pdfVIP

· 1302 · 安徽医科大学学报 ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Sep；49(9) Beclinl和 LC3在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义 陈 恳 ，郝宗耀 ，周 骏 ，樊 松 ，梁朝朝 摘要 目的 探讨 Beclinl和微管相关蛋白1轻链 3(LC3) 的膀胱尿路上皮癌患者56例，32例正常膀胱组织 在膀胱尿路上皮癌中的表达及两者的相关性。方法 通过 作对照。56例患者中男47例，女9例；年龄43—81 免疫组化法检测56例膀胱尿路上皮癌和32例正常膀胱组 (63．1±8．9)岁。肿瘤临床分期按 TNM标准：I期 织的Beclinl和LC3表达 ，对比表达的差异。结果 膀胱尿 9例，Ⅱ期23例，Ⅲ期21例，Ⅳ期3例；肿瘤生长方 路上皮组织 Beclinl阳性表达率为66．1％ (37／56)，显著低 式：乳头状 15例，浸润性41例；有淋巴结转移患者 于正常膀胱组织的93．8％(30／32)，差异有统计学意义 (P 2例。 0．01)，而癌组织中LC3阳性表达率为50％(28／56)，亦显著 低于正常膀胱组织 87．5％(28／32)，差异有统计学意义(P 1．2 免疫组化法分析 Beclinl和 LC3两种蛋 白的 0．01)；Beclinl和 LC3表达均与患者临床分期有关 (P 表达 一抗采用Beclinl兔抗人单克隆抗体 (美国 0．01)，与患者年龄、性别及肿瘤生长方式不具有相关性 (P SantaCruz公司)和LC3兔抗人单克隆抗体 (美 国 0．05)；Beclinl和LC3在膀胱尿路上皮癌中的表达具有正 CeUSignalingTechnology公司)，采用sP法，操作按 相关性 (P0．01)。结论 膀胱尿路上皮癌中Beclinl和 试剂盒说明书进行。主要包括：石蜡切片脱蜡，胰酶 LC3阳性表达率低于正常膀胱组织 ，两者可能均与膀胱尿路 抗原修复，滴加过氧化酶阻断液 (37qC，封 闭 10 上皮癌的发生发展有关。 min)，后用 10％非免疫性动物血清 (37℃，孵育40 关键词 Beclinl；LC3；膀胱尿路上皮癌；免疫组织化学 min)，随后滴加 Beclinl抗体 (1：100，4oC过夜)或 中图分类号 R34；R737．14；R-331 LC3抗体(1：100，4℃过夜)，再用生物素标记的鼠 文献标志码 A 文章编号 l000—1492(2014)09—1302—03 抗兔二抗(37℃，孵育20min)，DAB显色。苏木精 复染。用PBS代替一抗做阴性对照，用已知膀胱尿 自噬广泛存在于正常的生理过程，又是细胞对 路上皮癌阳性片做阳性对照。 不 良环境的一种防御机制，同时还参与多种疾病的 1．3 结果判定 Beclinl、LC3阳性表达为棕黄色颗 病理过程，包括多种恶性肿瘤 ¨J。Beclinl和LC3均 粒。Beclinl阳性见于细胞质，细胞间质及细胞核均 是参与 自噬体形成的重要基因，Beclinl是 自噬特异 不表达 ，而 LC3阳性表达见于细胞质，强阳性时细 性基因，在 自噬的溶酶体降解过程中起到肿瘤抑制 胞问质和细胞核中亦可见表达。每张