温敏性壳聚糖共聚膜的制备与细胞吸附-脱附行为.pdfVIP

V01．29 高等学校化学学报 No．5 2008年5月 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 106l—1064 温敏性壳聚糖共聚膜的制备 与细胞吸附／脱附行为 陈 莉1，李世庚1，肖 飞1，张爱华2，姚康德2 (1．天津市改性与功能纤维重点实验室，天津工业大学材料科学与化学工程学院，天津300160； 2．天津大学高分子材料研究所，天津300072) 物的结构和组成．对P(CS-AAc—NIPAAm)共聚膜的动态接触角及对细胞的吸附与脱附行为研究发现，共聚 膜表现出良好的温度敏感性，其表面成功地种植了成纤维细胞(L929)．当环境温度降低后，共聚膜表面细 胞自动脱附，从而避免了使用酶解法脱附细胞造成的细胞功能损伤． 关键词聚Ⅳ一异丙基丙烯酰胺；壳聚糖；温度敏感性；细胞培养；细胞脱附 中图分类号0631；R318文献标识码A 文章编号0251J昕90(2008)05．1061-04 由于聚Ⅳ-异丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)典型的温敏特性，使其在生物和制药等方面具有广阔的开 发应用前景¨。1．有关PNIPAAm的研究很多，但大多集中在药物释放、酶的固定化以及生物分离等方 面卜“。，而将PNIPAAm用于组织工程材料的研究则很少报道．在细胞培养过程中，细胞传代时使用的 筑三维组织方面提出了新方法．他们将温敏性PNIPAAm接枝于组织培养用的TCPS表面，利用温度改 变调控细胞黏附／脱附，初步实现了对细胞的保护． 善其生物相容性，使其在细胞培养过程中促进细胞贴附、铺展以及增殖等一系列细胞行为，需要脱附 细胞时又可以利用其温敏特性，在不使用酶解法的前提下，仅通过改变温度来达到人工控制细胞脱附 的目的．． 1实验部分 1．1试剂与仪器 其它药品均为国产分析纯． VECTOR PHI 22红外光谱仪，德国Bruker公司；ELMER5600型x射线光电子能谱仪；DCAT21 SurfaceTension． 动态接触角测试仪，德国Dataphysics 1．2 P(CS-AAc-NIPAAm)共聚膜的制备 将1g壳聚糖溶于100mL质量分数为1％的稀盐酸溶液中，加入适量的偶联剂EDC和促进剂 mL Ⅳ，J7、r，Ⅳ’，J7＼，’一四甲基乙二胺(TEMED)，在磁力搅拌下滴加15AAc，于室温反应30h．过滤除去杂 质，加入氢氧化钠中和反应液中的残留酸．析出CS．AAc．水洗至中性，再用无水乙醇洗涤3次，真空 干燥6—8h，得到CS．AAc单体粉末． 收稿13期：2007-09一11． 基金项目：国家自然科学基金(批准号和教育部博士学科点基金(批准号：20050058001)资助 联系人简介：陈莉，女。博士，教授，博士生导师，从事生物材料研究．E-mail：chenlis@tjpu．edu．cn 万方数据万方数据 1062 高等学校化学学报 V01．29 将上述CS．AAc和NIPAAm按质量比为1：3溶于20mL质量分数为1％的稀盐酸中，加入0．02g 过硫酸胺作引发剂，充N：气30min．以适量TEMED作促进剂，密封，于室温反应12h后，将溶液倒 入细胞培养板中，于室温自然干燥后形成二维共聚膜．将此共聚膜用质量分数为1％的NaOH中和膜 中残留的酸后，膜自动从培养板底部浮起，用去离子水浸泡，换水除去残留物． 1．3材料的结构表征 PHI 光谱．样品的XPS能谱图通过ELMER NIPAAm)溶液涂覆在盖玻片上，干燥后置于动态接触角测试仪下用液槽法测量动态接触角． 1．4细胞培养与脱附实验 h更换一次细胞培养液，并在倒置 进行培