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Jupiter柱用于蛋白质和多肽的提纯.doc
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Jupiter柱
用于蛋白质、低聚物和高分子的分析和提纯
2 孔径为300Aring;,用于蛋白质大分子(分子量大于15,000),低聚物和高分子的分析;
2 在pH1.5-10范围内稳定使用3000小时;
2 分析、纯化过程中不改变蛋白质分子的;
2 有5micro;,10micro;,15micro;的固定相可供选择;
2 每根5micro;的柱子都有出产测试谱图。
峰型锐利效能高
JupiterTM
设计用来分析和纯化蛋白质和大分子物质。超纯硅胶(99.99%)和致密的键合相使峰型变得更加锐利,并且几乎对分离的蛋白质没有特殊的吸附。致密的键合相和较大的硅胶表面积使得JupiterTM
柱能够承受更高的样品负荷。峰形锐利的峰形,对蛋白质没有特殊的破坏性吸收使得JupiterTM柱成为极佳的生物分析提纯柱。
PICTURE
(P137,F1) 肽类激素
规格: 250×4.6mm
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈/水(90:10)
梯度: a)8min内A/B(90:10)到A/B(74:26)(B每分钟增加2%)
b)6min内A/B(74:26)到A/B(70:30)(B每分钟增加0.57%)
流速: 1.0mL/min
检测: UV@214nm
样品: 1. 8-精催产素(半胱-酪-异亮-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱-脯-精-甘-NH2)
2. 血管加压素(半胱-酪-苯丙-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱-脯-精-甘-NH2)
3. 4-丝-8-异亮催产素(半胱-酪-异亮-丝-天门冬酰胺-半胱-脯-异亮-精-NH2)
4. 催产素(半胱-酪-异亮-谷酰胺-天门冬酰胺-半胱-脯-亮-甘-NH2)
在pH1.5-10中稳定
JupiterTM特殊的键合工艺获得了高键合率和键合匀称性,另外,致密的键合也使得JupiterTM柱在pH1.5-10的范围内有3000小时的使用寿命,对pH值的宽广适应性使得JupiterTM柱更容易洗脱含蛋白生物活性剂的流动相。
低三氟乙酸条件
当使用ESI把样品组分导入质谱系统时,三氟乙酸的存在实际上是一种缺陷。三氟乙酸在常规的工作浓度(0.1%)时,由于它作为竞争离子,形成粒子对的能力较强,使得质谱系统中样品离子化的程度降低。所以,三氟乙酸的存在虽然改变了峰的形状,但明显降低了LC/ESI-MS系统的灵敏度。而JupiterTM柱,在三氟乙酸只含0.01%的条件下,对蛋白质的分离也能也能得到很好的峰形。
PICTURE
(P138,F1)蛋白质在0.1%三氟乙酸下运行
柱子: Jupiter 5μ C4 300Aring;
规格: 250×4.6mm
货号: 00G-4167-E0
流速: 1.0mL/min
流动相: A:0.1%三氟乙酸水溶液
B:0.1%三氟乙酸溶于乙腈
梯度: 20min内A/B(75:25)到A/B(5:95)
检测: UV@214nm
温度: 35℃
样品: 1.胰岛素
2.胰蛋白酶原
3.乳清蛋白
4.肌红蛋白
5.碳酸酐酶
快速LC/MC分析
2 降低分析时间,溶剂使用量和色谱柱平衡时间,在某些应用上可以降低70%左右。
2 虽然样品的通过速率增加了大概70%。但是保持了保留很好的灵敏度、分辨率和质谱数据的精度。
以下是用JupiterTM 5micro;300Aring;LC/MC 50×2.0柱和Jupiter 5micro;300Aring;250×2.0mm柱,做蛋白质和多肽样品的分析比较。
PICTURE
(P138,F2)蛋白质在0.1%三氟乙酸下运行
柱子
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