实验八核糖核酸的组分鉴定.pptVIP

实验 八 核糖核酸的组分鉴定 一、实验目的 掌握核糖核酸组分鉴定的原理。 学会鉴定核糖核酸组分的方法。 核糖核酸的组成成分主要包括核糖、磷酸和碱基。 2.在碱性环境下，嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀，但此处碱性环境不能用一般的强碱，否则强碱会与银离子反应产生沉淀而干扰结果判定。 3. 核糖核酸与浓盐酸共热时，会发生降解，形成的核糖继而转变成糠醛，后者可与3，5-二羟基甲苯（地衣酚）反应，在Fe3+或Cu2+催化下，生成绿色复合物。 4. 磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应，生成蓝色物质。因此，可以根据以上性质，设计实验对各组分进行鉴定。 三、 试剂 （1）1.5M硫酸； （2）0.1mol/L硝酸银溶液； （3）1mol/L浓氨水； （4）三氯化铁-浓盐酸溶液： （5）地衣酚-乙醇溶液： （6）定磷试剂：17%的硫酸，10%的抗坏血酸和2.5%的钼酸铵。 1. 取100mg实验七中提取的酵母RNA，加入1.5M H2SO4溶液5mL，在沸水浴中加热10-20分钟，使核酸充分水解后，用于对各组分的鉴定。 2. 磷酸组分鉴定：取水解液1mL，加入干净的试管中，再加入等体积的新配制的定磷试剂1mL，混匀后，在45℃左右的水浴中加热15-30min，观察颜色变化。 3. 嘌呤碱的鉴定：取水解液1mL，加入干净的试管中，加入过量