顶空气相色谱法测定全血中乙醇的含量.pdfVIP

维普资讯 医学I}缶床研究 2008年6月 鲞 笙 塑 嬖! ： ! ! · 临床研究 · 顶空气相色谱法测定全血 中乙醇的含量 潘静 (中南大学湘雅医院药剂科，湖南 长沙 410008) [摘要]【目的】建立顶空气相色谱法 内标法测定全血 中乙醇浓度。 【方法】分析柱为FFAP30rnx0．53 mm ID色谱柱 ，载气为 N。，检测器为 FID；0．4mL全血样品以小瓶密封 ，40℃下平衡 40rain，用气体进样器取 顶空进样 0．6mL，内标法定量。 【结果】本法 日内精密度2．74 ，日间精密度2．69 ，回收率 96．53 ～ 100．35％。 【结论】本法操作简便快速，灵敏度高，结果准确可靠。 [关键词] 色谱法，气相； 乙醇 ／分析 [中图分类号] R916．4 [文献标识码] A [文章编号] 1671—7171(2008)06—1088—02 血 中乙醇含量测定方法 国内主要有化学 比色 有 良好 的专一性 。乙醇保 留时间为 1．2min左右 ， 法、气相色谱法 、酶学测定法 ，其 中以气相色谱法更 内标乙腈保留时间为 1．6min左右。 1 4 准确 、简便 。由于无法从血中提取乙醇，气相色谱法 1．2．4 回收率及精密度实验 用空 白血清将乙醇 中有直接进样 、沉淀蛋白法和顶空法_l 。本文建立 标准贮备液稀释成 0．0624~4．996g／L的系列浓度 了一种简便快速的顶空气相色谱法测定血中乙醇浓 溶液 ，按 1．2．2项方法处理并测定 ，以乙醇峰面积 度，无需特殊进样装置，测定准确。 与内标峰面积 比值对乙醇浓度进行线性回归。得 回 归方程为 ：A 乙醇 ／乙腈一0．8145C一 0．01227，r一 1 材料与方法 0．9991。定量下限为 0．0624g／L。取空 白血清及 1．1 仪器与试药 日本岛津 GC一14B气相色谱仪 ； 乙醇标准贮备液 ，按 “线性范 围”项下方法制备乙醇 FID检测器 ；江申色谱工作站 。无水乙醇为AR级 ， 低、中、高三个浓度 (0．1249、1．249、4．996g／L)的样 乙腈为色谱纯 ，实验用水为重蒸馏水。 品，每一浓度平行操作 5份，代入线性方程计算浓 1．2 方法 度 ，以测得值与加入值的比值计算 回收率 ，并计算 日 1．2．1 气相色谱条件 HP—FFAP毛细管柱 (0．53 内精密度 。连续 3d配制并测定上述浓度样 品，考 mmX1．0肚II]×30m)，柱温为 60℃；进样El温度为 察方法 日间精密度 。见表 1。 100℃，检测器温度为 150℃；载气为高纯氮，柱前压 表 1 方法 回收率及 El内El间精密度( 一5) 为 50kPa，尾吹为 30mL／mim空气为 50kPa，氢 气为 55kPa；放大器量程为 101；进样量为 0．6mL。 分流进样 ，分流 比为 2：1。内标法定量 ，内标为乙 腈。水浴温度选择 40℃以下。平衡时间：选择 30 m ill。 3 讨论 1．2．2 溶液的制备 对照液的制备 ：分别精密称取 文献 多采用填充柱分析 乙醇，如 GDX一102， 无水乙醇适量 ，以蒸馏水稀释至浓度约为 50g／L的 PEG20M 为固定相l3“]，大 口径毛细管色谱柱相 比 储备液。顶空样 品的制备 ：取体积一致 的约 10mL 较填充柱而言，具有高效、高分离 的优点，相 比普通 容积 的若干干净抗生素小瓶 ，精密加内标 乙腈溶液