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第 21 卷 　第 4 期 光 　学 　学 　报 Vol. 21 ,No. 4 2001 年 4 月 ACTA OPTICA SIN ICA April , 2001 文章编号 : 0座机电话号码 2001 0450904 活体声荧光成像研究 何永红 　邢 　达 　唐永红 　谭石慈 华南师范大学激光生命科学研究所 , 广州 510631 摘要 : 　声荧光应用于生物组织成像研究是最近二年发展起来的新兴领域 ,本文报道利用高灵敏度的致冷 CCD 探 测系统获取了活体声荧光图像 , 同时利用一种能在活体内增强声荧光的化学发光试剂 FCLA Fluoresceinyl Cypridina Luminescent Analog ,海荧荧光素类似物 ,成功地实现了动物在体成像。这种方法可望在医学影像诊断中 得到广泛的实际应用。 关键词 : 　活体声荧光 ; 成像 ; 海荧荧光素类似物 中图分类号: Q63 　　　文献标识码 : A 1 　引　　言 的 致 冷 CCD Princeton Instruments , TE/ CCD 512 T KB , - 60 ℃ 和大数字孔径的照相镜头 1934 年 ,Frensel 等[1 ]第一次报道了超声在液体 Nikon , 1 ∶12 组成 ,CCD 由 ST130 控制器控制并 内产生声荧光现象,后来的研究表明[2 ,3 ] ,声荧光源 将信号输入计算机 , 由 Winview 软件处理。此系统 于声的空化效应 ,在空化气泡破裂的瞬间辐射出强 具有量子效率高 峰值量子效率可达 80 % 、本底噪 的等离子体荧光。Hilgenfeldt 等[4 ] 提出气泡被压缩 声极为均匀、信噪比大等特点。其可探测极限达 破裂的瞬间光辐射理论 ,认为声荧光辐射是包括韧 009 Photon/ s ·pixel 。超声信号经功率放大后驱动 致辐射和电子 离子复合辐射的复杂过程。根据这 直径为 3 cm 的超声换能器 ,超声功率为 50 W 、频率 一理论计算出气泡温度为 20000 K～30000 K ,辐射 为40 kHz ,超声场为柱形 ,到达鼠体的功率密度约为 μ 光谱集中在紫外区 ,气泡破裂半径约为 55 m , 破 2 018 W/ cm 。 裂瞬间声荧光辐射脉宽小于 50 ps ,这些都与实验结 果很好地吻合。 有关声荧光研究应用于生物医学领域是近二年 发展起来的[4 ,5 ] 。1998 年 Wang 等[4 ] 首次利用声荧 光在模拟的高散射介质中成像 ,实验中采用 Luminol 来增强声荧光 ,并预示声荧光应用于医学诊断成像 的可能性。但Luminol 是一种工作在碱性环境下的 脂溶性试剂 ,不可能在体使用。 本文报道利用弱超声激发对活体 裸鼠 的声荧 光成像实验 , 同时发现一种能在体使用的水溶性化 Fig. 1 A schematic diagram of experimental setup 学发光试剂海荧荧光素类似物 FCLA ,可有效增强 海荧荧光素类似物购自日本东京化成工业株式 声荧光 ,并利用它成功地实现了在体成像。 μ 会社 ,用三蒸水配制成 5 mol/ L 溶液。利用吸收光 谱仪测量其吸收谱 ,再以其在 283 nm 的吸收峰激 2 　实验仪器与方法 发 ,用荧光分光光度计 岛津 , RF540 型 测量其荧 实验装置如图 1 所示。其探测部分由背向照明 光光谱 ,再以一个典型体外产生单线态氧的化学反 应体系[12 ] : OH - + NaClO + H O 体系检测海荧荧 2 2 国家杰出青年科学基金和广东省自然科学基金资助项 光素类似物的化学发光光谱。具体方法为 : 配制 目。 5 μ NaOH p H 8 溶液 ,再用此溶液分别配 mol/ L 收稿日期 :1座机电话号码 ; 收到修改稿日期 :1座机电话号码 制 28 μ μ O 溶液 , mol/ L NaClO 溶液和 10 mol/ L H2 2 ? 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. 光 　　　学 　　　学 　　　报 21 卷 510 将它们混合后 ,立即加入海荧荧光素类似物 ,用分光 的曝光时间为 15 min 。鉴于声荧光穿透能力的限 光度计测量其化学发光光谱。 制 ,这应该认为主要是鼠体表组织和浅层组织的发 取荷瘤 人神经胶质瘤细胞 SWO38 移植肿瘤 光图像 ,可以看出裸鼠身体比较清晰的轮廓 ,各处强 裸鼠 ,用 05 %戊巴比妥钠 05 ml 腹腔注射麻醉后 ,