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第十章基因信息传递.ppt
第三篇 基因信息传递 基因:是为生物活性产物编码的 DNA 功能片断, 其产物主要是蛋白质及RNA。 复制(replication) 转录(transcription) 翻译(translation) 基因表达:就是转录和翻译的过程。 第十章 DNA 的生物合成(复制) 复制:遗传信息从亲代 DNA 传递到 子代 DNA 分子上,称为复制。 DNA 的生物合成包括三种情况: DNA 复制 DNA 修复 逆转录 第一节 复制的基本规律 半保留复制 双向复制 半不连续复制 高保真性 半保留复制:复制时,母链的双链 DNA 解开成两股单链,各自作为模 板指导子链合成新的互补链。 两个子代 DNA 分别保留一条亲代 DNA 链,各自与新合成的互补链组 成双螺旋分子。 半保留复制的意义 由于 DNA 分子中的碱基互补关系, 一股链可以确定其互补链的碱基序 列。按半保留复制的方式,子代保 留了亲代 DNA 的全部遗传信息。 二、双向复制 双向复制:原核生物从一个固定 的起始点(ori)开始,同时向两 个方向进行复制,称为双向复制。 复制叉:复制时双链打开,分开 成两股,新链沿着张开的模板生 成,形成复制叉。 真核生物的染色体有多个复制起 始点。 复制子:两个复制起始点之间的 DNA 片段称为复制子。 三、复制的半不连续性 冈崎片段(Okazaki fragment) DNA 复制中,一股链是可以连续进 行的,成为领头链。其合成方向与 复制叉的前进方向相同。 另一股链是不连续复制,称为随从 链。其合成方向与复制叉的前进方 向相反。 第二节 DNA 复制的酶学 复制是在酶催化下的核苷酸聚合过程,需要: 高能底物:dATP, dCTP, dGTP, dTTP 总称 dNTP 聚合酶:依赖 DNA 的 DNA 聚合酶(DNA-pol)。 模板:解开成单链 DNA 的母链。 引物:提供 3’-OH 末端,使 dNTP 可依次聚合。 其他酶和蛋白因子。 一、复制的化学反应 DNA合成的总反应为: dATP dCTP dGTP (dNMP)n dTTP 分步反应可简写为: (dNMP)n+ dNTP (dNMP)n+1 +PPi DNA 聚合的反应底物为高能底物 反应底物为脱氧三磷酸核苷 dNTP。 碱基: A C G T 脱氧核苷: dA dC dG dT 脱氧一磷酸核苷: dAMP dCMP dGMP dTMP 脱氧三磷酸核苷: dATP dCTP dGTP dTTP DNA 链的合成方向是 5’→3’核苷酸之间以磷酸二酯键结合在 DNA 链的生成过程中,需要模板,引物的参与,引物提供3’ 末端的-OH基,在碱基配对的原则下,由模板指导进行5’→3’ 的延长。 二、DNA 聚合酶 DNA 聚合酶是依赖 DNA 的 DNA 聚合 酶(DNA-dependent DNA polymerase) 原核生物的DNA 聚合酶 DNA-polⅠ DNA-polⅡ DNA-polⅢ Klenow 片段是原核生物 DNA-polⅠ水 解后得到的大片段,具有5’ 3’ 聚 合活性和 3’ 5’ 外切酶活性。 真核生物的DNA聚合酶 三、复制的保真性 三种机制确保 DNA 复制的保真性 1、严格遵守碱基的配对原则。 2、聚合酶在复制延长中对碱基的选择 功能。 3、复制出错时有即时的校读功能。 四、复制中解链和DNA分子的拓扑学变化 (一)解螺旋酶:将DNA双螺旋解开 成为单链。 (二)DNA 拓扑异构酶:松弛调整超 螺旋。 (三)单链 DNA 结合蛋白(SSB): 维持复制中的 DNA 模板处于单链状态。 五、DNA 连接酶 连接酶连接双链 DNA 中的单链缺口。 第三节 DNA 生物合成过程 一、复制的起始 (一)DNA 解成单链 双向复制:原核生物从一个固定的起 始点(ori)开始,同时向两个方向 进行复制,称为双向复制。 (二)引发体的形成 引物酶按照 DNA 模板的配对序列, 催化聚合 NTP 形成 RNA 引物。 引物长度为十几到几十的核苷酸, 合成方向为 5’→3’。 引物酶和引发体 引物酶:一种 RNA 聚合酶。 引物:由引物酶催化聚合的短链 RNA 分子,为 DNA 聚合提供 3’-OH。 引发体:由引物酶和解螺旋酶等组成, 将 DNA 双链打开,合成 RNA 引物, 为 DNA 聚合创造条件。 二、复制的延长 DNA 复制中,一股链是可以连续进行 的,成为领头链。其合成方向与复制 叉的前进方向相同。 另一股链是不连续复制,称为随从链。 其合成
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