差异表达小RNA及下游靶基因与胃癌淋巴结转移与关系研究.pdfVIP

差异表达小RNA及其下游靶基因与胃癌淋巴结转移的关系研究 中文摘要 中文摘要 本研究通过比较胃癌原发灶与配对淋巴结转移灶中小RNA表达谱，寻找差 异表达小RNA，并检测其在胃癌原发灶中的表达量，研究差异表达小RNA与胃 癌淋巴结转移的关系。最后通过生物信息学方法预测其靶基因，研究小RNA参 与胃癌淋巴结转移的下游通路，旨在为胃癌淋巴结转移机制研究探寻潜在的靶基 因。 一、激光捕获显微切割纯化肿瘤与RNA质检体系的建立 目的：建立激光显微切割纯化肿瘤与微量RNA提取、质检的标准流程，为 后续实验提供质量可靠的RNA标本。方法：使用紫外分光光度仪、琼脂糖凝胶 电泳、real．timePCR检测不同离体时间正常胃粘膜中RNA降解的情况。选取5 例胃癌原发灶及配对淋巴结转移灶，使用激光捕获显微切割获得纯化肿瘤标本， 紫外分光光度仪、琼脂糖凝胶电泳、Agilent2100生物分析仪检测纯化标本的RNA 质量。结果：抽提自离体时间分别为O’，15’，30’，60’，120’，240’的胃正常粘 膜中的总RNA未见明显降解； 组中的表达量无明显差异。激光捕获显微切割8um厚切片10ram2能获得606． 生物分析仪检测见激光捕获