产岩藻多糖酶海洋真菌的筛选与液态发酵研究.pdfVIP

产岩藻多糖酶海洋真菌的筛选和液态发酵研究 张袁L1，吴茜茜‘，王杏文’，蔡敬民“毛’，张敏’，潘仁瑞‘ l(合肥学院生物与环境工程系，安擞合肥230022) 2(安徽农业大学生命科学院，安徽合肥230036) 岩藻多糖是一种含硫多糖。它属于异多聚碳水化合物，主要成分为L一岩藻糖 (Fucose)，还包括半乳糖和少量的木糖、半乳糖醛酸、甘露糖等多种单糖。 近年来研究结果表甥，岩藻多糖具有多种生理功能，主要表现为：①具有抗 凝血和抗血栓作用。②具有抗病毒功效。此外，岩藻多糖还具有抗肿瘤，消炎等 功效。但是，岩藻多糖的分子量过大，容易产生抗原性和明显的毒副作用，这在 一定程度上阻碍了岩藻多糖的开发与实际应用。初步的研究结果表明，经过酶法 制备的低分子量岩藻多糖，不仅保留了岩藻多糖的生物学活性，而且溶液的粘度 有所降低，从而克服了该糖在应用中产生的抗原性和毒副作用。 我们通过对厦门海边地区采集不同样品(海水·海砂·海泥·软体动物·腐 木·藻类等)，用稀释平板法分离海洋微生物．其中分离出真菌131株。通过透明 圈法对所筛真菌进行初筛，共筛选出29株透明圈较为明显的真菌。然后对这29 株真菌进行活化和液态发酵，DNS法测定它们的酶活。我们发现菌株PZ320，PZ321， IU／ml，2．43IU／ml，3．83 PZ322的酶活力较高，分别为1．79 IU／ml。为了提 高岩藻多糖酶的产量，我们对菌株PZ322的培养基组成和培养条件进行优化。 对菌株PZ322产岩藻多糖酶发酵培养基组成的优化试验，得到较优培养基的 配方。当培养基组成为(％)：麸皮5，海带粉2，(NH)．So|l时，可以获得较高的酶 活。 IU／ml。 进一步以1％，3％，5％，7％为接种量时．5％的接种量酶活力最高为4．22 麸皮浓度过高或过低都不利于酶活力提高，原因可能是低浓度造成营养不足，高 浓度则影响溶氧量造成菌体后期生长缓慢，酶活力下降。将培养基pH调至6．5时， r／min的速度 酶活力较高。温度为28℃时，酶活力最高。在恒温振荡器中以180 振荡培养，岩藻多糖酶酶活力可达4．22IU／ml。可能是因为转速过低影响溶氧量， 过高又影响菌体和培养基的接触和其对营养的吸收。 本试验菌种与前人比较，酶活较高。但酶活力仍然较低，还需进一步试验。 我们正在通过离子注入的方法来提高其酶活力，且诱变后菌株酶活力的提高较为 明显。 参考文献： [1】吴茜茜，吴克，张洁等，2006．海洋真菌Fusariumsp．LD8岩藻多糖酶的液态 发酵条件研究．菌物学报25(1)：77’82 【2]王鹏，蔡敬民，秦松，吴茜茜，吴克，王锐．徐涤，2004．海洋细菌Bacillus sp．H-TP2岩藻多糖酶的生产和酶学性质．食品与发酵工业，3：13-15 [33张惟杰(主编)，1987．复合多糖生化研究技术．杭州：浙江大学出版社，1-744 ’通讯作者：蔡敬民(1963．)，男．长期从事酶工程、发酵J：程、环境微生物、海洋微生物 天然产物等方面的研究．Emaih 180