临床分离食品动物源多重耐药大肠杆菌耐药分子特征研究.pdfVIP

第3O卷 第 11期 中 国 预 防 兽 医 学 报 VO1．30．No．11 2008 年 11月 ChineseJournalofPreventiveVeterinaryMedicine NOV． 2008 临床分离食品动物源多重耐药 大肠杆菌耐药分子特征研究 蒋红霞，吕殿红，陈杖榴，陈继荣，谢远 东，曾振灵 (华南农业大学 兽医学院 广东省兽药研制与安全评价重点实验室，广东 广州 510642) 摘 要：本研究从主动外排机制、膜孔蛋白缺失及氟喹诺酮类药物作用靶位改变等几个方面探讨，临床分离的 20株动物源性 多重耐药大肠杆菌的耐药分子特征。实验结果表明，20株临床分离大肠杆菌 gyrA83、gyrA87、 parC80的突变率分别为95％、85％、55％。gyrA和parC共 同突变的有 l1株，突变率为 55％；20株多重耐药菌 大肠杆菌普遍存在主动外排机制，主要介导对部分氨基糖苷类、四环素、氟苯尼考和氟喹诺酮类药物耐药，当添 加外排泵抑制剂PABN后多数菌株庆大霉素、新霉素、四环素、氟苯尼考及氟喹诺酮类药物的MIC都降低了2 倍～256倍。利用建立的ELISA方法检测外排泵AcrA蛋 白的表达水平，结果证实所有临床分离菌外排泵表达都 增高；20株分离大肠杆菌中，部分菌株缺失OmpC或 OmpF蛋 白，同时缺失这两个蛋白的只有 3株。部分菌株 OmpF蛋 白条带附近存在有多重耐药相关蛋 白(Mar)。本研究结果揭示多重耐药大肠杆菌对常用抗茵药物高水平的 耐药表型是主动外排机制、药物作用靶位 的改变、外膜通透性的改变及其它机制共 同作用的结果。 关键词 ：大肠杆菌；主动外排 ；膜孔蛋 白；靶位突变；PABN；耐药性 中图分类号 ：$852．612 文献标识码 ：A 文章编号 ：1008—0589(2008)l1-0836．06 CharacterizationofmultipleresistantEscherichiacoli isolatesfrOm food—producinganimals JIANG Hong·xia，LV Dian—hong，CHEN Zhang—liu，CHEN Ji·rong，XIEYuan—dong，ZENG Zhen—ling (GuangdongProvincialKeyLaboratoryofVeterinary PharmaceuticsDevelopmentandSafetyEvaluation， CollegeofVeterinaryMedicine，SouthChinaAgriculturalUniversity，GuangZhou510642，China) Abstract：Twentymulti—drugresistantE．coliisolateswereanalyzedformechanismsofdrugresistance．Itwasshownthatthe occurrenceoffluoroquinolonesresistantrelatedmutationingyrA83，g~A87andparC80were95％，85％ and55％，respectively． Co—mutationsinGyrA and ParC subunitswere found in 11of20 isolates．MIC ofmostisolatesforgentamicin，neomycin， tetracycline，florfenicolandfluoroquinolonesdecreased2-256foldsinpresenceofeffluxpumpinhibitorPApN，whichconfirmed theexistenceofeffluxpumpamongthemostisolates．Anincreasedexpressionofeffiuxproteininoutermembraneof20E．coli isolatescouldbedetectedwithAcrA