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维普资讯
安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2008，36(17)：7233—7237 责任编辑 王 淼 责任校对 马君叶
家蚕生物钟基因Bmtim2的克隆与序列分析
赵浩勤1，李佳梅z，夏定国-．2，张业顺-一2，张国政
(1．江苏科技大学，江苏镇江 212003；2．中国农业科学院蚕业研究所，农业部家蚕生物技术重点开放实验室 ，江苏镇江 212018)
摘要 f目的1为进一步研究家蚕生物钟基因的功能提供依据。f方法1从家蚕品种p50未受精卵提取总RNA，利用快速扩增 cDNA末端
(RACE)技术克隆家蚕生物钟基 因Bmtim2cDNA序列。最后运用实时定量 RT-PCR对该基 因在家蚕不同发育时期的表达情况进行
初步分析。结『果]利用RACE扩增 ，获得长度为 1867bp、包括完整3非翻译区的家蚕生物钟基 因timeless2(Bmtim2)cDNA序列。经推
导，获得该基因序列编码的584个氨基酸残基的蛋白质序列。该蛋白序列具有TIM蛋白的c末端保守区，与黑腹果蝇、尖音库蚊的
TIM2基因具有近缘进化关系。Bmtim2基因在家蚕生活周期各时点均有表达。f结论1该结果对研究Bmtim2基因在家蚕发育过程的时
空表达差异及其与 日周节律的关系具有参考价值。
关键词 家蚕 ；Timeless2基 因；克隆
中图分类号 $881．2+6 文献标识码 A 文章编号 O517—6611(2008)17—07233—05
CloningandSequenceAnalysisofBiologicalClockGeneBmtim2inBombyxmoriL．
ZHAOHao-qinetal(JiangsuUniversityofScienceandTechnology，Zhenjiang，Jiangsu212003)
Abstract O【bjective]TheresearchaimedtoprovidebasisforfurtherresearchonthefunctionsofbiologicalclockgeneinBombyxmoriL
M【ethod]TotalRNAwasextractedfromunfertilizedeggofsilkwormvarietyp50．Bmtim2cDNAsequenceofthebiologicalclockgenewascloned
byusingrapidamplicationofcDNAends (RACE)technology．FinallytheexpressionofthisgeneindifferentgrowthstagesofB．mori’was
preliminarilystudiedbyusingReal-timequantitativePCR．R【esult]cDNAsequenceofthebiologicalclockgenetimeless2 (Bmtim2)in mori
withthelengthof1867bpwhichincludedcomplete3 untranslatedregionwasobtainedthroughRACEamplification．ThrorLghderivating,the
proteinsequencewith584aminoacidresiduesthatwascodedbythisgenesequencewasobtained．TheproteinsequencehadC-terminal
conservativeregionofTIM proteinandithadclosely-relatedevolutionrelationshipwithTIM 2geneofDrosophilamelanogasterandCulex
pipiens．Bmtim2genewasexpressedateachtimepointofthelifecyclein且mori．C【onclusion]Theseresultshadanimportantreferencevalue
ofrstudyingthetime-spaceexpressiondifferencesofBmtim2geneinthegrowthprocessofB．morianditsrel
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