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红豆杉内生真菌产紫杉醇相关基因BAPT的鉴定及初步研究.pdf
生物技术通报
·研究报告 · 2006年增刊
B IO TECHN OLO G Y BULL E T IN
红豆杉内生真菌产紫杉醇相关基因
BAPT 的鉴定及初步研究
2 1 2 1
李嘉琳 胡鸢雷 陈维多 林忠平
( 1 北京大学 ,北京 100871; 2 东北农业大学 ,哈尔滨 150030)
摘 要 : 从几种红豆杉中先后分离了 30余种内生真菌 ,深入研究了三种能够产紫杉醇的内生真菌 。形态学
( ) ( )
观察及 18 srDNA 鉴定它们分属于 F usa rium 属 和 P es ta lotiops is 属 ,三个菌株均可以在离体培养的条件下产生紫
μ (
杉醇 ,经两周培养产量可分别达到 8. 5, 3 1. 5, 3 1. 1 g/L 。 其中 P es ta lotiops is1分离于南方红豆杉 , F usa rium 1分离于
) (
东北红豆杉 , Pe stalotiop sis2 分离于 中国红豆杉 。对这些 内生真菌产紫杉醇的初步机理作 了研究 。BA PT C
)
13p henylp rop anoid side chainCoA acyltran sfera se 是红豆杉中紫杉醇合成途径里支链合成的关键酶之一 ,我们根据其
保守区序列设计了引物 ,首次在能产生紫杉醇的上述三种红豆杉内生真菌中克隆得到了 BA PT基因片段 ,而分离
的其它真菌并没有得到扩增 。序列分析表明 ,来自内生真菌的 BA PT基因片段序列与红豆杉 BA PT基因片段序列
( )
具有非常高的相似性 98. 9% 。推测红豆杉内生真菌之所以能够合成紫杉醇 ,相关基因可能直接源于其宿主植
物 ,即其遗传学起源是基因转移而不是共进化 。这同时也建立了一种快速经济的鉴定产紫杉醇真菌的辅助方法 。
内生真菌的遗传稳定性及改良在进一步研究中。
关键词 : 红豆杉 紫杉醇 内生真菌 BA PT基因 基因转移
Iden tif ica tion and P ilot Study of Taxus Engophytic Fung i’s
Taxolproduc ing Correla tion Gene BAPT
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