草原红牛微卫星标记研究的论文.pdfVIP

反刍动物分子遗传与育种Ⅲ219 草原红牛微卫星标记研究① 李向阳1②张嘉保2③刘殿峰1 (1．内蒙古民族大学成人教育学院，通辽，028042) (2．吉林大学实验动物中心，长春，130062) 扩增、扩增产物的聚丙烯酰胺电泳分型、计算机凝胶成像分析系统分析各位点等位基因及全部个体的标 6 GA44、IDVGA55等住基因数分别为6…6 草原红牛遗传育种研究是可行的。 关键词：草原红牛；微卫星；标记 草原红牛是新中国成立后培育的第一个乳肉兼用型品种，育种开始于20世纪50年代，系采用英国 短角牛与当地蒙古牛级进杂交、横交固定和自繁提高等三个阶段培育而成，1985年经国家育种委员会 鉴定而正式命名。草原红牛具有生长发育快、生产性能高、适应北方寒冷地区气候条件、耐粗饲、抗逆性 强、遗传力稳定、肉质鲜嫩、风味独特，且泌乳性能强等优良特性。草原红牛是发展我国特色牛肉产业， 增强牛肉及相关产品的国际竞争力，发展我国肉牛产业的品牌优势所在。 微卫星DNA是短的、串联的简单序列重复(Simple 复的数目是可变的而呈现高度的多态性，以及在单个微卫星位点上可作共显性的等位基因分析，杂合子 比例高，信息含量大，以及其保守性等特点，使其引物可在不同实验室交流，并适合自动化操作等优点， 近年来微卫星标记作为比较理想的分子标记广泛应用于遗传图谱的构建、居群遗传学以及系统发育的 研究之中。它以高度的多态性信息量和PCR技术的方便性使其表现出更大优势。因此，利用微卫星标 记技术研究草原红牛遗传多态性，为其育种及肉用性能改良提供理论依据。 1材料与方法 1．1材料 本试验选用草原红牛(30头)血液或肝脏采自吉林省农业科学院畜牧分院，一206c保存备用。 1．2方法 1．2．1 引物的筛选与合成 引物序列通过Genbank查得。所用软件为Primer Biosoft premier5．0(PREMIER 卫星位点的引物序列及PCR扩增反应条件见表1。 ①资助项目：国家高技术研究发展计划(s63计划)项目，课题编号为2001AA243051 @作者简介：李向阳(1972．)，男，山东黄县人，讲师．硕士，研究方向：分子遗传与动物育种 ③通讯作者：张嘉保(1963．)，博士，教授，博士生导师，研究方向：动物繁殖技术与遗传标记 220m中国动物遗传育种研究进展 表1 8对微卫星引物的特性及PCR反应条件 i．2．2 1 23 PCR产物的检测及电泳分型扩增产物在8％变性聚丙烯酰胺凝胶胶上电泳分型。 1．2．4微卫星标记的统计量分析 并作出遗传聚类图，根据公式计算各位点有效等位基因数。杂合度(H)：用于衡量微卫星标记的信息含 量。一般来讲，群体进化时间越长，群体基因杂合度就越大，因此，群体的分化位置应该与基因杂合度一 致。其中m为等位基因数，Pj为基因频率。 ∑P。：1H：l一∑碍 i—I KL 多态信息量(PIC)：它表示的是一个后代所获得某个等位标记来自于他父亲的同一个等位标记可能 性(概率)，其cp只和P，为第i和第i个等位基因。 ，n m一1 4 PIC=1一∑P；一∑∑(嘲)2 i=1 】J=，十1 1．3结果判读 根据聚丙烯酰胺凝胶}二DNA泳动距离进行结果判读。如果条带泳动距离一致，即表现为单态性，若有差 异即为多态性。统计5个品种在研究位点上表现山多态性带的数日，扩增结果按Lynch氏法计算相似系数并 果记为…0’，扩增带是1条为纯合子，扩增带是2条则为杂合子，并确定个体基因型[4I。 2结果与分析 2．1基图纽DNA提取结果 对采集的牛血液或肝脏，用常规的酚／