代谢安对老龄大鼠代谢综合征血管损伤保护作用研究的论文.pdfVIP

实验研究 代谢安对老龄大鼠代谢综合征血管损伤保护作用研究 赵敏1余海滨1李建生2张伟字2 (1．河南中医学院第一附属医院2．河南中医学院老年医学研究所) 代谢综合征和心脑血管疾病的发生具有密切的相关性，Ms已成为一种新的慢性病争公共卫生 问题“喇．本研究选择益气化瘀，降浊化痰的中药制剂代谢安对老龄大鼠代谢综合征所致的血管损 伤进行干预，探索中药对其保护作用。 1．材科和方法 1．1实验动物 动字第410117号)． 1．2造模和评价 按照文献呻1方法进行老龄代谢综合征造模，24周时，对所有的老龄模型大鼠进行代谢综合征 确定惦大鼠模型成功。模型成功大鼠用于进一步干预实验。 1．3分组和用药 选取模型成功老龄大鼠随机分为老龄模型组(8只)、罗格列酮组(8只)、代谢安组(8只)， 并设老龄正常组(8只)作为对照组。老年正常对照组继续以普通饲料喂养，老龄模型组、罗格列 酮组、代谢安组继续投以造模饲料，并分别灌胃蒸馏水、罗格列酮和代谢安药物。各组均自由饮水． 兰素史克有限公司批号和中药代谢安颗粒(河南中医学院第一附属医院药剂中心)。 分别用蒸馏水配制溶液，每日一次空腹灌胃，剂量：文迪雅：0．3mg·kg-1·d一，代谢安：0．56 g·kgl·d-I，灌胃干预均为8周。 1．4指标测定和取材 1．4．1肥胖相关指标 1．4．1．1体重电子秤三次秤重。取其平均值。单位以克表示 1．4．1．2体长实验结束时在麻醉状态下测定大鼠的体长．测量鼻到肛门的长度为体长，并计算 Lee’S肥胖指数=[体重埔(g)／体长(cm)]×103。 1．4．1．3内脏脂肪处死大鼠后，取肠系膜、双侧附睾旁及双侧肾周脂肪组织称重．合计为内脏脂 肪，单位以克表示。并计算内脏脂肪重量占体重的百分比． 328 1．4．2血压：采用PBP-1B型尾动脉无创容积血压测量仪，在动物安静状态下测定3次，取其平均 值为收缩压．单位以BHg表示。 法测定胰岛素(解放军总医院东亚免疫所放射免疫分析试剂盒)，单位以mlU·L表示。采用 hioMerieux-Cinline 150全自动生化仪酶免法测定血脂(南京建成生物工程研究所试剂盒)，单位 以mmol·L表示。 1．4．3血管取材与病理观察32周末，全部动物禁食12小时后，10％水合氯醛腹腔麻醉。麻醉成功 后剖开腹腔。穿刺腹主动脉取动脉血5ml，分离血清，-70C保存．测定血糖、胰岛素。再用0．01％ 后血管取材。部位选取右颈总动脉、冠状动脉、胸主动脉，别进行常规病理和电镜标本准备。 1．4．4内皮、平滑肌细胞增殖指数切片常规脱蜡，梯度乙醇至水后常规PCNASABC染色，苏木精衬 染，光镜下观察并摄片。设立空白及阳性对照组。PCNA阳性细胞计数数：每张切片高倍视野(×400) muscle 连续计数400个平滑肌细胞(smoothcell，SMC)及100个内皮细胞(endothelialcell，EC) 细胞PcNA阳性细胞核数／100)，然后换算成百分比。 1．4．5胶原和弹力弹力纤维面积比值取材胸主动脉，常规石蜡包埋，连续横切片，厚4姗。间隔取 Gieson 连续的4个血管横切面，分别裱在4张载玻片上。每4张切片分别进行：HE染色，。Van 法(饱和苦味酸水溶液(约1．22％)150ml，1％酸性品红10ml两种溶液用前混合在一起)染色 胶原纤维和WEIGERT间苯二酚复红染弹性纤维。光镜下用计算机图像分析处理系统在每一血管横 截面取相互垂直的4个测量点，分别测量胶原纤维和弹性纤维的绝对面积，取平均值，并计算二者 的比值。 l-5．统计分析 采用SPSSl3．0统计软件。所有数据全部建立相应数据库。各指标检测数据结果以均数±标准 Hoc ANOVA分析方法，postMutipleComparisons各组均数多重比较。先进行方差齐性检验，满 足方差齐性时LSD法(1east-significant 进行组间差异的显著性比较，以PO．05为有统计学差异。 2．结果 2．1 32周时各组大鼠体重、Lee，S、腹腔脂肪及脂肪／体重的比较(见表1) 表I第32周各组大鼠体重、Le