红藻氨酸诱导PC12细胞凋亡与阿魏酸对神经元的保护作用研究.pdfVIP

红藻氨酸诱导PC12 细胞凋亡及阿魏酸对神经元的保护作用研究 1 1 1 1 2 1 陈勤 ，于剑奇 ，施其权 ，叶海燕 ，陈逸青 ，余嗣明 （1 安徽大学生命科学学院，安徽省中药研究与开发重点实验室，安徽 合肥 230601 ；2 安 徽医科大学第一临床学院，安徽 合肥 230032) ［摘 要］ 目的：探讨阿魏酸对红藻氨酸诱导PC12 细胞凋亡的保护作用机制。方法： 采用 50.0 μmol.L-1KA诱导PC12 细胞凋亡建立AD神经细胞模型，然后将处理后的PC12 细胞 -1)处理的低、中、高剂量组，同 分为KA模型组和KA ＋阿魏酸(25.0，50.0，100.0 μmol. Ｌ 时设立正常对照组。采用MTT 比色法检测PC12 细胞的存活率；采用免疫细胞化学法观察 PC12 细胞中凋亡蛋白Bcl-2 、Bax和Cyt c 的表达；膜联蛋白- Ⅴ，PI双染流式细胞仪检测PC12 的细胞凋亡率，蛋白免疫印记技术检测PC12 细胞中Bcl-2 、Bax和Cyt c的表达水平。结果： MTT法和凋亡蛋白表达检测显示，与正常组相比，模型组PC12 细胞的存活率明显下降，且 细胞中Bcl-2 表达减少(P0.01) ，而Bax和Cyt c表达升高，Bcl-2/Bax 比值下降(P0.01) ，流式 细胞检测细胞的凋亡率显示，模型组细胞的凋亡率显著上升(P0.01) 。蛋白印迹术检测显示， 模型组细胞中Bcl-2 表达量减少，Bax和Cyt c表达量升高，与正常组比较，差异极显著(P均 -1组细胞的存活 0.01) 。当采用阿魏酸干预后，与模型组相比，25.0 ，50.0，100.0 μmol. Ｌ 率明显上升，细胞凋亡率减少，而且能增加Bcl-2 阳性百分率和表达水平，明显减少Bax和 Cyt c阳性百分率和表达水平，使Bcl-2/Bax 比值增加 (P0.05 ，P0.01 ，P0.01) 。结论：KA -1 -1 在 50.0 μmol.L 剂量时可明显诱导PC12 发生凋亡，阿魏酸在 25.0 ～ 100.0 μmol. Ｌ 剂量 时能显著抑制KA诱导的PC12 细胞凋亡，其神经保护机制可能是通过抑制Bax和Cyt c 的表达， 升高Bcl-2 表达和Bcl-2/Bax 比值，从而阻断内源性细胞凋亡通路而提高神经细胞的存活率。 ［关键词］阿魏酸；Kainic acid ；PC12 细胞；细胞凋亡；细胞色素 Study of apoptosis of PC12 cell induced by Kainic acid and protection of ferulic acid on neurons 1＊ 1 1 1 2 1 CHEN Qin ，YU JIAN-qi ，SHI QI-quan ，YE HAI-yan ，CHEN Yiqing ，YU Si-ming (1.School of Life Science，Anhui University，，Anhui Province Key Laboratory of RD of Chinese Medicine ，Hefei 230039 ，Anhui China；2. First Clinical College ，Anhui Medical University ，Hefei Anhui ，230032，China) Abstract AIM ：To investigate the protec