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蛋白质化学复习高中三年级生物课件.ppt
镰刀型红细胞贫血 (二)血红蛋白的构象变化与结合氧 Hb与Mb一样能可逆地与O2结合, Hb与O2结合后称为氧合Hb。 Mb和Hb的氧合曲线比较 别构效应(allosteric effect) 蛋白质空间结构的改变伴随其功能的变化,称为别构效应。 疯牛病 蛋白质的带电状态 当溶液pH=pI时,蛋白质所带正、负电荷相等; 当溶液pH<pI时,蛋白质带净正电荷; 当溶液pH>pI时,蛋白质带净负电荷. 电泳示意图 * 免疫沉淀法:将某一纯化蛋白质免疫动物可获得抗该蛋白的特异抗体。利用特异抗体识别相应的抗原蛋白,并形成抗原抗体复合物的性质,可从蛋白质混合溶液中分离获得抗原蛋白。 (三)电泳 蛋白质在高于或低于其pI的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动。这种通过蛋白质在电场中泳动而达到分离各种蛋白质的技术, 称为电泳(elctrophoresis) 。 * 蛋白质结构与功能的关系 The Relation of Structure and Function of Protein 第 三 节 (一)一级结构是空间构象的基础 一、蛋白质一级结构与功能的关系 牛核糖核酸酶的一级结构 二硫键 十字绣/ 十字绣之家http://www.szxclub十字绣/ 十字绣之家/ 十字绣图案大全/picture/十字绣绣法/xiufa/十字绣品牌/pinpai/.com/ 天然状态,有催化活性 尿素、 β-巯基乙醇 去除尿素、 β-巯基乙醇 非折叠状态,无活性 (二)一级结构与功能的关系 例:镰刀形红细胞贫血 这种由蛋白质分子发生变异所导致的疾病,称为“分子病”,分子病是可以遗传的。 ?-链N端氨基酸排列顺序 1 2 3 4 5 6 7 8 Hb-A(正常人) Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Glu-Lys… Hb-S(患 者) Val-His-Leu-Thr-Pro-Val-Glu-Lys… 镰刀形红细胞 正常红细胞 正常红细胞与镰刀形红细胞的扫描电镜图 (一)肌红蛋白与血红蛋白的结构 二、蛋白质空间结构与功能的关系 肌红蛋白 血红蛋白 别构效应物: H+ 、CO2 Hb + H+ + CO2 H+ Hb + O2 CO2 在肌肉中 pH7.2 (脱氧) 在肺部 pH7.6 (氧合) pH对Hb与氧亲和力的影响 (三)蛋白质构象改变与疾病 蛋白质构象疾病:若蛋白质的折叠发生错误,尽管其一级结构不变,但蛋白质的构象发生改变,仍可影响其功能,严重时可导致疾病发生。 蛋白质构象改变导致疾病的机理:有些蛋白质错误折叠后相互聚集,常形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀,产生毒性而致病,表现为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。 这类疾病包括:老年痴呆症、亨停顿舞蹈病、疯牛病等。 第四节 蛋白质的理化性质与分离纯化 The Physical and Chemical Characters and Separation and Purification of Protein (一)蛋白质的两性电离 一、理化性质 蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外,氨基酸残基侧链中某些基团,在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团。 * 蛋白质的等电点( isoelectric point, pI) 当蛋白质溶液处于某一pH时,蛋白质解离成正、负离子的趋势相等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。 含碱性氨基酸较多的蛋白质,其等电点较高 含酸性氨基酸较多的蛋白质,其等电点较低 一般,pI 7 ( - 5),血液 pH 7.35 - 7.45。 因此,蛋白质大都以负离子形式存在。 (二) 沉淀与变性 1. 蛋白质的沉淀: 蛋白质是高分子,在水溶液中能稳定,主要是与下面两种因素有关: 稳 定 因 素 带有电荷 分子外的 水化膜 去除电荷 -- 调 pH=pI 去除水化膜 -- 加脱水剂如电解质 沉淀 沉淀 (1)盐析: 实质是破坏分子的水化膜 原因:强电解质水化作用使蛋白质分子外部水化膜破坏,而使蛋白质不能溶于水。 强电解质: (NH4)2SO4、Na2SO4、NaCl 等
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