MDR1基因短发卡样RNA表达载体逆转K562-A02人白血病细胞多药耐药的研究.pdfVIP

·422· 生堡胜疽塞圭呈墅至鱼旦箍!!鲞箜鱼翅垦塾垫!Q些丛：血些呈堂：型垫：№：鱼 ．基础研究． MDRl基因短发卡样RNA表达载体逆转 飚62／A02人白血病细胞多药耐药的研究 肖希斌谢兆霞秦群 【摘要】 目的构建MDRl基因短发卡样RNA(shRNA)真核表达载体，观察对飚62／A02人白 血病细胞株MDRl基因的沉默作用以及对P一糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响。方法以基因重组 胞株，通过半定量RT．PcR和蛋白质印迹法，检测MDRl基因表达及P—gp表达水平的变化；以MrITI法 检测阿霉素(ADM)对l(562／A02细胞的半数抑制浓度(Ic卯)；高效液相色谱(HPLc)法检测细胞内 ADM含量。结果 制飚62／A02细胞株MDRl基因表达，抑制率最高为48．2％士2．5％；同时抑制P-印蛋白的表达，抑 制率最高为50．67％。对ADM药物敏感性的相对逆转效率分别为40．8％和62．4％；同时使硒62／ shRNA表达载体可明显抑制飚62／A02细胞MDRlmRNA的转 A02细胞内ADM含量增加。结论