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《医学遗传学实验》——小鼠睾丸染色体制备.ppt
* * 实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备 医学遗传学系 一、实验目的 1、掌握快速制备动物染色体的方法; 2、观察小鼠染色体的数目及形态特征。 二、实验原理 活体内注射秋水仙素使细胞停止在分裂中期;低渗处理,使细胞膜胀破、染色体分散,从而得到染色体的中期分裂相;固定剂处理使染色体结构保持完整,防止染色体收缩。 静置5min 三、实验内容与步骤 腹腔注射秋水仙素 处死小鼠 (损伤脊髓法) 取睾丸,剥离白膜, 剪碎曲细精管 第一次低渗:0.4%KCL,37℃,5ml→10 ml,吹打2 min 37℃ 静置2min 弃上清 第二次低渗: 0.4%KCL, 37℃,10ml, 吹打2min, 37℃静置5min 弃上清 固定:8ml新鲜固定液,10 min 离心:1000rpm,8min 弃上清 软化:60%冰醋酸,3ml,3min 滴片,烘干 染色:室温下10min 细流冲洗,晾干 镜检观察
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