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猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立.pdf
营养研究 《饲料工业》·2010 年第31 卷第1 期
猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立
职爱民 左建军 黄志毅 邹仕庚 冯定远
摘 要 用机械刮取小肠粘膜加胶原酶Ⅱ消化的方法，采用新生未吮乳仔猪小肠组织，成功地分
离了猪小肠粘膜上皮细胞（Intestinal epithelial cells, IEC）且在体外培养传代，并采用碱性磷酸酶和角
蛋白免疫学试验鉴定，结果表明：体外培养的猪IEC 在DMEM-F12 培养基中，细胞在 1~2 d 贴壁，5~6
d 形成细胞克隆，9~11 d 融合成片；碱性磷酸酶和生物素标记的细胞角蛋白抗体鉴定结果显示90%培
养的细胞为阳性，分别从生化的角度证明和细胞生物学角度鉴定了所培养的细胞为IEC 。
关键词 猪；小肠粘膜细胞；原代培养
中图分类号 S828
肠粘膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells, IEC)是 省原种猪场。
肠道的重要功能细胞，参与肠道食糜的消化、吸收、免 1.2 主要仪器设备与试剂
疫屏障和应激反应等，并与肠道的内、外分泌功能关 型 细胞培养箱 公司，美国 ；
NU-2500 CO2 (Nuaire )
系十分密切。 长期以来，在研究 的生物学功能、细 型倒置生物显微镜 公司， 日本 ；
IEC IX70 (Olympus ) 5804R
胞增殖和分化的调控因素，物质吸收与代谢等多采用 型高速大容量冷冻离心机 公司德国 ；
(Eppendorf , ) SW-
[1]
肠道肿瘤细胞系为试验模型 。 然而癌细胞是非正常 型超净工作台 苏州净化，中国 ； 型高
CJ-1F ( ) HVE-50
的细胞，其生理特征明显不同于正常细胞，单纯由癌 压蒸汽灭菌锅 公司，日本； 型
(H
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