《医学细胞生物学》细胞融合 设计型实验设计报告.docVIP

医学细胞生物学设计性实验设计报告 姓名 余囯清 班级 2011级k―3 学号 1120150305 评分 实验项目： 动物细胞融合、细胞核的分离与鉴定 实验原理： 细胞融合又称细胞杂交，他是指细胞彼此接触时，两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的现象。在自然情况下，体内或体外培养细胞间所发生的融合，称为自然融合。而在体外用人工方法（使用融合诱导因子）促使相同或不同细胞间发生融合，称为人工诱导融合。 人工诱导融合中常用的诱导因子有：生物的（如灭活的仙台病毒）﹑化学的（如聚乙二醇）和物理的（如电融合）因子。聚乙二醇是一种去垢剂，易得，用法简单﹑融合效果稳定，是目前运用的比较多的一种诱导剂。 细胞融合的范围佷广，从种内、种间、属间、科间一直到动植物两界之间都获得了成功。目前，这一技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种的重要手段。 实验步骤： （一）50%PEG液的制备 称取一定量的PEG（MV=4000）放入试管内在酒精灯火焰上加热，使其熔化，待冷至50℃时，加入等体积并预热的无血清1640液混匀。置之37℃水浴箱种保温待用。（二）融合方法：1.一瓶已长成HeLa细胞或CHO细胞，按常规方法消化制成细胞悬液。如果用鸡血细胞，可取肝素抗凝的弃血清鸡血0.1ml。 2.将悬液移入离心管中，以800r/mi