细胞凋亡_Apoptosis_Apo_及其检测方法.pdfVIP

∀#2004 12 31 ( Apoptosis, Apo) 1 1 2 任 平, 高明辉 , 李慧姝 ( 1. 黑龙江畜牧兽医职业学院, 黑龙江 双城 150111; 2. 佳木斯铁路兽医卫生段, 黑龙江 佳木斯 154007) : S85 1. 34 : B : 1004 7034( 2004) 12 0031 02 细胞凋亡是指机体在一 生理病理条件下为维持内环境 分析仪检测法等, 且还在继续发展和完善但经过人们多年的 稳 , 通过基因控制而使细胞主动有序的死亡, 表现一系列形 研究发现, 原位末端转移酶标记法能检出早期未发生典型变化 态和生化方面的特征细胞凋亡是细胞正常的死亡, 它涉及一 的凋亡细胞, 具有灵敏度高, 特异性强等特点 系列基因的激活表达以及调控等作用, 不造成炎症和自体的 2. 1 损伤, 是细胞为了更好地适应自下而上环境而主动争取的死亡 对组织切片或细胞悬液进行形态学观察, 常用的方法有普 过程因这一死亡过程严格受到程序的控制, 又称细胞程序性 通光镜观察法活细胞悬滴荧光染色镜检法凋亡小体电镜观 死亡( Progammed ell death, PCD) 察法等 随着分子生物学细胞生物学免疫学和肿瘤学的研究发 下面仅介绍光镜下Apo 与细胞坏死的差异在光镜下观 展, 人体对细胞凋亡的重大理论意义和实际意义有了更深的理 察Apo 的细胞都是单个散在分布, 呈现胞体缩小, 染色质广泛 解为病原菌入侵机体而引起疾病的机理有了新的认识, 为肿 固缩, 常聚集于核膜呈界限分明的颗粒块状或新月牙形小体, 瘤和自身免疫性疾病的防治等方面的研究提供了新的思路 而后核碎裂形成凋亡小体因凋亡小体的完成约数分钟, 因此 1 (Apo) (PCD) 在组织切片上不易看到而发生细胞坏死的细胞在光镜下, 常 从严格的词意来讲, PCD 与Apo 是有区别的早在 1956 是某一区域内的一群细胞或一块组织早期也可发生核固缩, 年PCD 的概念就被提出, 是胚胎学家在观察胚胎发育过程中 但染色质分布不规则边界不清到后期胞浆肿胀明显, 核溶 及幼儿体到成体发育中, 发现某些细胞在发育到某一阶段自然 解消失, 不形成凋亡小体, 细胞器结构常被破坏 就死亡了, 并且可以预测, 是严格受到程序控制的正常组成部 本法优点是简便经济, 可 性 位不足之处是特异性 分如蝌蚪在变成青蛙的过程中, 其尾部常伴有大量的细胞死 差, 无法 量, 在组织成分及细胞死亡类型复杂的情况下, 难以 亡或消失, 所以PCD 是发育学功能上的变化, 而Apo 是形态学 判断结果 上的概念, 它描述体内细胞形态上的变化特征, 同细胞坏死不 2. 2 同但是一般情况下Apo 与 PCD 这两个概念可以交互使用, 细胞发生凋亡时, 细胞染色体的DNA 被降解, 产生不同长 具有同等意义 度的寡聚核苷酸片段, 把降解的片段置于含溴化乙锭的1. 5% Apo 与细胞坏死是两种不同的死亡方式细胞坏死是指 琼脂糖凝胶中进行电泳, Apo 呈现特征性典型的 梯状 条带 细胞在各种致损伤因素的作用下, 引起细胞无序死亡的过程 而细胞坏死时, 常由细胞损伤而引起的DNA 无规律的断裂, 伴 形态特征为细胞胀大, 特别是细胞器肿大, 胞膜破裂, 胞浆内容 有组蛋白降解, 在琼脂凝胶电泳上呈模糊的弥漫膜状条带 物外泄, 而核变化较慢, DNA 降解不充分, 进而引起局部严重 本法优点是操作简便易行, 性准确, 并可进行 量检测 的炎症反应细胞凋亡是正常细胞受基因调控的