第十一章转录复习提要.docVIP

第 十 一 章RNA的生物合成（转录）RNA Biosynthesis, Transcription 概述 基因表达：通过转录和翻译、用基因的遗传信息在细胞内合成有功能蛋白质(生物活性产物)的过程。 转录 (transcription) ：生物体以DNA为模板合成RNA的过程 转录与复制的相似之处： 都是酶促的核苷酸聚合过程 都以DNA为模板 都需依赖DNA的聚合酶 聚合过程都是核苷酸之间生成磷酸二酯键 都从5’至3’方向延伸聚核苷酸链 都遵从碱基配对规律 复制和转录的区别 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶: RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 第一节 模板和酶Templates and Enzymes 一、转录模板 DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因(structural gene)。 DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链。相对的另一股单链是编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链。 不对称转录(asymmetric transcription) 含义： 在DNA分子双链上某一区段，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录 ； 模板链并非永远在同一条单链上。 二、RNA聚合酶 （一）原核生物的RNA聚合酶组成与功能 核心酶 (core enzyme)：（ (2 ( ((） 全酶 (holoenzyme): （ (2 ( (( (） （二）真核生物的RNA聚合酶 种类与产物： RNA-polⅡ最大亚基羧基末端结构域（carboxyl terminal domain，CTD） （YSPTSPS）n 三、模板上酶的辨认、结合 原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。 RNA聚合酶结合模板DNA的部位，称为启动子(promoter)。 RNA聚合酶保护法 原核生物启动子保守序列: -35 区:T T G A C A RNA-pol辨认位点(recognition site) -10 区: Pribnow box 第二节 转录过程(The Process of Transcription) 一、原核生物的转录过程 （一）转录起始 1 RNA聚合酶全酶 ((2((( () 与模板结合 2 DNA双链解开 , 形成转录空泡 3 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应 起始复合物: RNApol - DNA - pppGpN- OH （二）转录延长 1. (亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 转录空泡(transcription bubble)：RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 （三）转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类: 依赖Rho (ρ)因子的转录终止; 非依赖Rho因子的转录终止 1. 依赖 Rho因子的转录终止 Rho因子终止转录的机制： 1) 很强的结合polyC的能力，与RNA3’端结合，使RNA聚合酶变构而终止转录 2) ATP酶和解螺旋酶活性解开DNA-RNA杂化链 2. 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录。 茎环结构使转录终止的机理: 使RNA聚合酶变构，转录停顿；使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 二、真核生物的转录起始 （一）转录起始 真核生物的转录起始上游区段比原核生物多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 1. 转录起始前的上游区段 顺式作用元件(cis-acting element)：真核基因上游DNA分子上起转录起始作用的共有序列。 大多数有TATAbox（-25bp）启动子的核心序列 增强子：远离基因而调控基因转录的DNA序列。 2. 转录因子 能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA的蛋白质，现已发现数百种，统称为反式作用因子(trans-acting factors)。