三氧化二砷和顺铂合用对肝癌细胞HepG2的作用研究.pdfVIP

现代消化及介入诊疗2007年第12卷增刊ModerⅡDigestion＆hIterv锄ti0Il2007，Voll2，suPpl 一265一 三氧化二砷与顺铂合用对肝癌细胞HepG2 的作用研究 、 温焕连 王晨龙 曾文铤 朱科伦 【摘要】目的探讨三氧化二砷(A蛾)与顺铂(cDDP)联合对肝癌细胞H印G2的作用研究。方法 应用MTT法和细胞免疫组化酶法检测B缸、Bcl_2、F勰蛋白的表达情况。结果AsIq与cDDP联合应用 在抑制肝癌细胞的生长繁殖、诱导肝癌细胞凋亡，增强B缸、Fas的表达，下调Bc卜2的表达方面均较各 自单药的作用明显增强。结论Asd嘎与cDDP联合应用具有明显的协同抗肝癌作用，其主要机制可能 As归；联合化疗能诱导肝癌细胞凋亡．其主要机制与增强Ba)【、Fas的表达，下调Bcl一2的表达有关。 【关键词】三氧化二砷；顺铂；肝癌；细胞凋亡 实验研究发现”三氧化二砷(A唰q)具有明显为O 的选择性抗肝癌作用．已将单药A剐03注射液用于 浓度三氧化二砷加B组各浓度顺铂：D组：阴性对 临床，取得了良好的疗效。顺铂(cDDP)属于细胞周照组，只有肝癌HepG2细胞，不加药物。 期非特异性抗癌药物，为临床一线抗肝癌化疗药。 3．M兀’法测定肝癌HepG2细胞生长抑制率 为探讨As20。联合cDDP对肝癌HepG2凋亡的机收集处于对数生长期的人肝癌HepG2细胞，用 制．进行了以下实验研究，现报道如下。 材料与方法 悬泐孔接种人96孔平底细胞培养板中．放人37℃ 一、材料 含5％cq的恒温孵育箱内孵育4—5h后，待细胞 1．细胞 贴壁后分别加入A组、B组及c组药物各100山， 人肝癌传代细胞系HepG2细胞(广州医学院微每组设三个复孔及空白对照孔，空白对照孔中只加 生物及免疫教研室提供)。 2．主要药物 液。置于恒温孵育箱内继续培养24h、48h、72h，于 h每孔加人5 亚砷酸注射液。哈尔滨伊达药业有限公司。注 培养结束前4 g，L的Mrr溶液30lll， 继续培养4h，吸除上清，加入0．04mo儿二甲基亚 射用顺铂(CDDP)，山东齐鲁制药厂。顺铂(cDDP)， 山东齐鲁制药厂产品，批号990618。使用时用RP- IlIIl处 MI-1640培养液稀释至所需浓度。 分钟至结晶溶解混匀，用酶联仪于波长570 二、方法 测定各7L吸光度值(OD值)，按照下列公式计算细 1．细胞培养 胞生长抑制率： HepG2细胞常规培养于RP~Ⅱ1640中，加入抑制率(％)=(1一实验孔平均oD值，对照孔平 均OD值)×100％ lo％小牛血清，青霉素(10万uL)、链霉素(100 of in mg／L)，单层培养于37℃含5％cq恒温培养箱内。采用两药相互作用系数(coeffcientdnIg 用接种传代第3日的细胞做实验．0．125％胰蛋白 下列公式进行计算： 酶、o．ol％EDTA消化，计数，调整适当浓度进行实 验。 CDI=AB，A×B 2．实验分组 根据活细胞数(吸光度值)进行计算