平面波导型荧光免疫传感器检测2%2c4-D研究.pdfVIP

第五届环境模拟与污染控制学术研讨会论文集 平面波导型荧光免疫传感器检测2，4-D的研究 宋保栋，施汉昌+，何苗 (清华大学环境科学与工程系，北京100084) 环境中残留的各类有毒有机污染物在浓度很低时也能对人类健康和生态平衡造成潜在的威胁， 为此世界各国和国际组织都对这些污染物的环境存量制定了严格的标准．如杀虫剂2。4一二氯苯氧乙 酸(2，4．D)是一种广泛使用的有机氯除草剂，其具有潜在的致癌性、致突变性，并影响人类的正常生 0-21． 育．世界卫生组织(wHO)以及我国饮用水卫生规范中均规定2,4．D的最大浓度小于30岭／L 小分子物质的传统检测方法包括气相色谱(GC)和高效液相色谱法(HPLc)，这些方法能够实现定 量测定，灵敏度和检测限都很高，但都需要复杂的预处理和昂贵的设备，且操作过程繁杂(萃取、还原、 衍生化和纯化)、耗时长，需要专门的技术人员进行操作，限制了常规检测的次数【341．基于免疫分析技 术【卅与传感技术相结合的免疫生物传感器，以其快速、简便和高灵敏性的特点在环境检测领域具有 很好的应用前景．其中平面波导型荧光免疫传感器具有信号稳定、灵敏度高、能够同时测定多种物 质等特点【7．舯，具有快速在线监测水中有机污染物浓度的潜力． 1材料与方法 1．1材料 传感基片采用国产K9玻璃材料，折射率为1．52，其表面镀一层SiO：． 卵清蛋I刍(OVA，Sigma)，胃蛋白酶(Pepsin，Sigma)，2，4一D单抗由本课题组余杨博士提供． 1．2传感基片的制备 裸玻璃片放入3mol／LNaOH中浸泡2min，取出后超纯水充分冲洗，再放入新鲜配制的混合液 h，超纯水充分冲洗后在室温下N2吹干．然后放入1％ABDMS的水 (坎H202)：坎H2S04)=2：3)中浸泡1 h后依次用甲苯、超纯水充分冲洗并在室温下N2吹干． ／甲苯溶液(O．25％)dP进行硅烷化处理，反应24 将玻璃片放入染色缸中，以200 mL／cm2的量加入磷酸缓冲液(10 mg／cm2的浓度加入琥珀酸酐，以1 mmol／L h，然后超 KH，PO。，pH7．4)，边振荡边加入3mol／L的NaoH溶液，控制溶液pH值为6～7，反应1 h，中途补加2次EDC，修 片的量将AMD溶液加在玻璃片的传感面上，在饱和水蒸气的湿盒中放置12 饰好的玻璃片用超纯水充分冲洗并N：吹干． 配制100 在饱和DMF蒸气的湿盒中反应12h，依次用DMF和超纯水冲洗，N2吹干． 1．3传感基片的活化与2，4-D的测定 超纯水配置一系列浓度的2,4．D溶液，作为代测样品，采用10倍浓度的PBS缓冲溶液配制2 mg／mL的OVA和l 代测样品混合，预反应5min后用传感器系统测定混合样品的响应． 1．9的HCI溶液、2 1．9) 测定结束后，分别用4mol／L的NaCI溶液、pH mg／mL的Pepsin溶液(pH 1。9)对芯片进行活化，再用有机溶液(坎乙腈)：坎丙酸)：坎水)=50：1：50)冲洗． 和O．5％的SDS溶液(pn 基金项目：国家。863”项目(2005AA6,U040) edu．en ·责任作者。教授，hanchangCa泌in#ua 第83页 第五届环境模拟与污染控制学术研讨会论文集 2结果与讨论 |