耐亚胺培南绿脓假单胞菌耐药特征与β内酰胺类耐药基因研究.pdfVIP

．165,- charact-errizationof inACinetobacter in and ofclass integrons genotypesemergence viet—ham：changes of class2 1 a baumannii：descriptionahybrid in—tegronscontaining min091ycoside in Vibriocholeraeol reistancegenec-丑ssettes integron[JJ．2000，44：2684—2688。 from to C1in strainsisolated 1979 1996[J]．J 9WhitePA，MclVERCJ．Integronsandgenecassettesin 37：734—741． Microbi01．1999， theenter．obacteriaceae[J]．AntimicrobAgents 8PloyMC，DeniSF，CourvalinP，eta1．Molecular Chemother，200l，45：265． 耐亚胺培南绿脓假单胞菌耐药特征及§内酰胺类耐药基因研究 颜英俊糜祖煌刘华杨明清黄文方 绿脓假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa，Pa)是临Eppendorfcentrifuge5417R低温离心机，恒温金属浴(杭 PeltierThermal Research)， 床常见病原菌之一。近年来，已出现耐亚胺培南和第三代、 州大和)，MJ Cycler(MJ 四代头孢菌素的Pa，且耐药率有不断上升趋势，给临床抗 DNALadder 感染治疗带来极大困难。研究发现，产各种9内酰胺酶， lOObp 外膜通透性降低，生物膜形成和主动泵出系统是Pa对亚胺 buffer(北京天为时代)，头孢哌酮／舒巴坦药敏纸片 培南和B内酰胺类抗生素耐药的主要机制。为了了解我院 (OXOID)。 豫胺培南耐药绿脓假单胞菌对常用抗生素的耐药情况以及 四、模板DNA提取 B一内酰胺类耐药相关基因的存在状况，我们进行了相关研 采用蛋白酶K消化法。 究，报告如下。 五、基因扩增 应用PCR方法，引物序列见表I。DHA基因热循环参数 材料和方法 为：93℃预变性3 最后一个72℃延伸5min，共循环35周期。其余基因热循 一、 菌株来源与质控菌株 环参数为：93℃预变性3 34株耐亚胺培南绿脓假单胞菌来自于2005．1-12月我 院住院病人的临床分离标本(包括：痰液、尿液、伤口分 为阴性对照。耐药基因检测试剂盒由无锡市克隆遗传技术 泌物、脓液、血液等)。质控菌株包括：绿脓假单胞菌 研究所提供。 ATCC27853，大肠埃希菌ATCC25922。 六、结果判断 二、菌株鉴定及药敏试验方法 取lOul扩增产物与2ul6×上样缓冲液混匀，点样于