蛋白质及氨基酸的测定.pptVIP

⑷结果计算 式中 X----氨基酸态氮的含量，g/100g； c ----氢氧化钠标准溶液的浓度，mol/L； V1----用中性红作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，mL； V2----用百里酚酞作指示剂滴定时消耗氢氧化钠标准溶液体积，mL； m----测定用样品溶液相当于样品的质量，g； 0.014----氮的毫摩尔质量，g/mmoL。 电位滴定法 (1) 原理 根据氨基酸的两性作用，加入甲醛以固定氨基的碱性，使羧基显示出酸性，将酸度计的玻璃电极及甘汞电极同时插入被测液中构成电池，用氢氧化钠标准溶液滴定，依据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。 (2) 试剂 ①酚酞乙醇指示液：1% ②硼砂（标准物质）缓冲液：PH9.22 称取3.8克Na2B4O7 溶解后，定容至1000mL ③中性甲醛溶液：２０% ④氢氧化钠标准溶液：0.0500mol/Ｌ (4) 试验步骤 ① 吸取含氨基酸约20mg的样品溶液，置于100mL容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取20.0mL置于200mL烧杯中，加水60mL，开动磁力搅拌器，用0.05mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2（记下消耗0.05mol/L氢氧化钠标准溶液的毫升数，可计算总酸含量）。 ② 加入10