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文献综述部分
多的包括:
】)利朋原核表达系统(人肠杆菌)或真核表达系统(酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞等)在体
外表达猪流感病毒流行毒株的HA基冈和NA基因,然后收获、浓缩和纯化目的蛋白,再进一步制
苗免疫。这种方法的优点是制各过程简单、目的蛋白产量大、主要成分可以定量配置。但由于体外
表达的蛋白难以维持或恢复天然蛋白的空间结构,蛋白纯化过程复杂、成本高,而且总体免疫效果
尚不及传统的全病毒灭活疫苗,因此对这类疫苗的生产工艺还需进一步改进。
码基囡串联后克隆到真核表达质粒中,然后再将重组DNA质粒导入机体细胞,通过机体内源性表达
并提呈给免疫系统,诱导宿主产生特异性免疫应答,发挥保护作用,这就是所谓的DNA疫苗。研究
结果表明,单纯依靠猪流感病毒HA基因免疫的DNA疫苗效果并不理想(特异性抗体水平低、攻毒
保护性差),如果共表达一些具有免疫调节作崩的细胞囡子,或者使用DNA疫苗后再用常规灭活疫
苗进行加强免疫,则可以明显提高免疫保护水平。但总体来看,这类DNA疫苗的免疫效果不确实,
重复性差,与传统全病毒灭活疫苗相比尚有一定差距,从实验室阶段到开发出成型产品还需要较长
的时间。
3)活载体基因工程距单位疫苗。母源抗体的存在对疫苗接种有负面影响,不仅延长了感染猪发
热和临床症状,而且与无母源抗体的免疫猪相比,猪流感病毒对具有母源抗体的免疫猪诱导的肺炎
更加严重,因此理想的疫苗还需要排除母源抗体的干扰,而活载体疫苗是很好的选择,被人们寄予
较大希望,并有可能实现商品化的疫苗。被用作载体的包括人腺病毒5型(humanadenovirus5.
adenovirus
HAd5)、猪腺病毒3型(porcine
等。这类载体普遍具有容易插入外源基因且对外源基因的容量大、自身相对稳定、基因组重排频率
低、不与宿主基因发生整合等优点。其中研究比较成熟的是以腺病毒为载体的猪流感亚单位基因工
对40日龄实验猪免疫2周后,HI抗体水平超过l:160,能有效抵抗同哑型猪流感强毒株的攻击。目
前华南农业大学开发的腺病毒载体猪流感疫苗已进入转基因安全评价阶段,应用前景良好。人们在
不断开发新的活载体基冈工程疫苗的同时,也在努力解决抗原浓缩、二次免疫受初次免疫抗体干扰、
部分猪只对细胞疫苗过敏等问题,希望不久的将来这类疫苗能够得到广泛应用,作为传统全病毒灭
活疫苗的补充。
4)DNA疫苗。DNA疫苗具有减毒疫苗的许多优点,但没有其毒力返祖和不同毒株间重组等风
I和MHC
险,尤其是抗原被MHC 11类分子所递呈,能激发体液和细胞免疫反应。Larsen等人用表
达HA基囚的DNA疫苗免疫2次猪后,获得了较高水平的特异性抗体和较理想的攻毒保护效果。晟
体,并且对致死性A型流感病毒(包括H5N1亚型AIV)攻击产生广谱保护作用。另外有人根据SIV
达的重组蛋白具有良好的抗原性,有望作为猪流感候选疫苗。但目前研制的DNA疫苗在免疫途径、
方法、程序等多方面还不成熟,免疫效果不稳定,离实际应用还有较大距离。
随着科学技术的进步和疫苗研究工作的不断深入,开发出安全、有效的猪流感疫苗将不再是遥
远的梦想。但必须强调的是,对于猪流感的防控,决不能仅仅依靠疫苗免疫这~种手段,加强日常
饲养管理、做好生物安全防护和综合防疫措施才是关键。
参考文献(略)
我国部分地区主要猪病的流行状态研究
赵建增·,赵亚荣,邢海云,刘明明,包爽
(福州大北农生物技术有限公司动物医学研究中心北京100097)
养猪业是我国畜牧业的重要支柱,在国民经济中的地位也举足轻重。随着养猪现代化和集约化
程度越来越高,以及生猪和疫苗的流通,传染病的流行正在成为阻碍其发展的瓶颈。例如,2006年
4
第三届猪病防控学术研讨会会议论文集
秋季出现于我国的高变异性PRRSV的流行给我国的养猪业就造成了难以评估的损失。在新形势下,
如何有效地预防和控制传染病已经成为养殖相关业者共同面临的新课题。为了客观评价我国的疫病
流行状态和防控措施,本研究对来自12个省(区)的数干份临床样品进行实验检验分析。
1材料方法
1.1主要试剂
术有限公司:猪瘟病毒(CSFV)抗体间接血凝试剂购自中国农业科学院兰州兽医研究所:CSFV荧
光抗体购自中国兽药监察所;所有RT-PCR和PCR系统均为本研究中
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