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象草幼穗离体培养植株再生研究 钟小仙1，余建明2，顾洪如1，张建丽1，倪万潮2 (1．江苏省农业科学院畜牧研究所，江苏南京210014：2．江苏省农业科学院农业生物遗传生理研究所，江苏南京210m4) 摘要：以象草幼穗为外植体材料、改良的MS为基本培养基，研究了不同外源激素组合对不同发育时期幼穗愈伤组织诱导 和植株再生能力的影响．结果表明：象草幼穗离体培养最适长度为2-5锄；愈伤组织诱导培养基中添加4．0mr,rE2，4．D+0．05 KT+O．5 IAA的分化培养基上，经过继代培养后的颗粒状愈伤组织的成苗率分别为36．4％和38．5％，总成苗率达50．2％ mg／L O．5mr,／L的1／2 和43．9％。3片叶大小的幼苗转入附加NAA MS壮根培养基，试管苗移栽成活率达95％以上。在继代培养 过程中逐代选择外表呈白色、干燥、紧密、颗粒状的愈伤组织，是提高其植株再生能力的有效方法。 关键词：象草；幼穗；离体培养；愈伤组织：植株再生 象草(Pennisetum Purpureum)为禾本科狼尾草属多年生草本植物，原产热带非洲，是适宜于热带和亚 热带地区种植的高产牧草¨扪，可用于草食畜禽养殖【3’4J、公路护坡幅1、中高档纸浆生产【6|7】，近年来的研究 表明象草还是一种理想的生物质能源作物，国内外种植面积有迅速扩大的趋势f9，10’11I。但由于象草为对光 照敏感的短日照作物，只能在北纬28‘以南地区正常开花完成生育过程及自然越冬n刳，在长江中下游及其 相同纬度地区主要作一年生利用，不能自然开花结实，在生产上采用种茎无性繁殖的方法提供种苗，且缺 乏抗寒、耐盐性强的象草品种，影响其大面积推广种植。 迄今为止，国内外尚未见象草幼穗组织培养植株再生的报道。本研究以象草N51幼穗为外植体材料， 试图探明不同激素组合对不同发育时期幼穗的愈伤组织诱导和植株再生能力的影响，以期建立起体细胞培 养植株再生技术体系，为实现象草工厂化试管苗生产和利用生物技术培育抗寒、耐盐新品种奠定基础。 1材料与方法 1．1材料 象草N51，1985年从美国引进，种茎无性繁殖保存，大田扩繁。参照陈礼伟等短日照处理方法n33，对象 草暗处理3周后，取缘草的幼穗进行离体培养。 1．2培养基 基本培养基由MS无机盐和B5有机成分组成，添加不同配比的激素组合，附加3％蔗糖 和0．8％琼脂，pH值为5．8。 愈伤组织诱导培养基和继代培养基添加设置不同的激素组合(见表1)。绿苗分化培养 2．0 基添加的激素组合为：SG,，附加CPPU mg／L+NAA0．Olmjg／L；SG2，附加KT0．5 mg／L+IAA0．5mg／L。 MS培养基，添加NAA0．5 壮根培养基为Rr：1／2 mg／L。 基金项目：国家科技部成果转化项目【编号：04EFl和江苏省农业三项工程项目【编号：sx(2005)0601资助． 作者简介：钟小仙(1968-)，女，汉族．浙江余姚人，副研究员．博士．E-maii：xiaoxian@jaas．ac．cn ‘ 表1愈伤组织诱导和继代培养基的激素组合 TablelHormone inthecallusinductionandsubculturemedium composition mg／L 1．3培养方法 剪取植株上半部，去掉叶片，在无菌条件下用70％的酒精擦拭包在幼穗外部的叶鞘和茎，剥出幼穗。 cm，直接接种；幼穗长度2~5cm，切成2-3 幼穗长度小于2 mlTl长的穗段；幼穗长度超过5em，则取幼穗