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激光显微切割_单细胞PCR技术在霍奇金淋巴瘤IgH基因检测中应用.pdf
108 临床与实验病理学杂志 J Clin Exp P atho l 2008 Jan; 24 ( 1)
激光显微切割- 单细胞 PCR技术在霍奇金淋巴瘤 IgH 基因检
测中应用
匡晓燕, 古杰鸣, 王守峰, 刘华庆, 邓 飞
: , ; ; ; 333 m g/L667 m g/L55 ∀ 2~ 3 h,
95 ∀ 10 m in K, 15 l
: R 733. 4 : B PCR
: 1001- 7399( 2008) 01- 0108- 03 1. 2. 5 珠蛋白基因扩增 # PCR :
, 25 ,l 10 ∃ Buffer 25 l, M gC l 25
2
Kppers mmol/L, dNTPs 200 m ol/L, 05 mol/L(
( H odg in!s lym phom a, H L) RS Ig http: / /gdbwww. gdb. org ), 1 g /L, DNA
, HL 125 U PCR HBB. P 21/ P 22;
, StepdownPCR, 1 l
( Laser capture m icrod issec , HBB. P 5/P 22% PCR:
tion, LCM ) , , 95 ∀ 10 m in, PCR 95 ∀ 60 s55
LCM - PCR ∀ 60 s72 ∀ 60 s, 72 ∀ 7 m in, 50;
HL S tepdown PCR , 73 ∀ 70 ∀ 67
∀ 64 ∀ 61 ∀ 58 ∀ , 42,
1
36
[ 1]
1. 1 6 ( Lymphnode w ith reac 1. 2. 6 IgH 基因重排检测 PCR
tivehyperp lasia, LRH), 3HL , , PCR FR3A / LJH, 3
1 HL ( NSHL )1 HL l, FR3A / VLJH, 95
( MCH L) 1H L( LCRHL) ∀ 5 m in; 95 ∀ 2 m in65 ∀ 4 m in72 ∀ 80
1. 2 s, 35, 95 ∀ 90 s, 65 ∀ 60 s, 72 ∀
1. 2. 1 待切割组织切片的制备 LCM EVA 80 s; 95∀ 60 s, 65 ∀ 60 s, 72 ∀ 60 s, 32
, ; 72 ∀ 7 m in
10~ 15 m,
2
1. 2. 2 免疫组织化学 ,
EVA EnV ision, 2. 1 1 PCR
37 ∀ 2 h 4 ∀
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