β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐液相分析方法.docVIP

NADP分析方法 一、范围 本标准规定了β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐的质量指标及检验方法。 结构式： 中文名：β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸二钠盐 英文名称：β-Triphosphopyridine nucleotide disodium salt CAS号：24292-60-2 分子式：C21H26N7Na2O17P3 分子量：787.37 质量指标 项 目 指 标 外观 pH(0.5mg/mL） 纯度% 含量% 水分% 三、检测项目 3.1 含量(HPLC) 仪器 岛津20AT HPLC 试剂 1.甲醇 HPLC级 2.Milli-Q 水 3.三氟乙酸 HPLC级 5.NADP对照品 色谱条件 色谱柱：Agilent SB-C18 5μm 4.6＊250mm 洗脱程序：梯度 流速：0.8 mL/min 分析时间：21 min 检测波长：260 nm 进样体积： 5uL 柱温：25 ℃ 保留时间：7.9min 梯度程序 时间（mins） A相（%v/v） B相（%v/v） 流速（mL/min） 0 100 0 0.8 6.7 96 4 0.8 13 92 18 1.0 14.2 92 18 15.0 100 0 1.2 21 100 0 1.2 流动相A 0.1%三氟乙酸：准确量取1 mL三氟乙酸溶于1L去离子水中，抽滤并超声脱气15 min后做为流动相A。 流动相 B HPLC 级甲醇 对照溶液 精密称取50 mg NADP标准品于100 mL容量瓶中，用去离子水溶解并定容至刻度。 样品溶液 精密称取50 mg NADP样品于100 mL容量瓶中，用去离子水溶解并定容至刻度。 进样程序 序号 样品名称 进样针数 1 空白（稀释液） 2 2 对照1 3 3 对照2 2 4 样品1 2 5 样品2 1 数据处理 Cstd:：对照品浓度 Astd：对照品峰面积 A样：样品峰面积 n：稀释倍数 m样：样品称样量 图谱 3.2 pH值测定 精密称取50 mg NADP样品于100 mL容量瓶中，用去离子水溶解并定容至刻度，利用pHS-3C型pH计测定pH值（操作见pHS-3C型pH计SOP）。 3.3 水分测定 精密称取50 mg NADP样品，放入卡尔费休水分滴定仪中（操作见卡尔费休水分滴定仪SOP），记录结果。 起草人： 审核人： 批准人：