近期实验计划和方案-黄刚.docVIP

近期实验计划---黄刚 一、10月25- 31号开始摸索豚鼠造模实验的条件，并提前准备好笼子和垫料。 二、10月29号开始联系订购动物，预计在11月3号左右能到。 三、11月4-7号饲养豚鼠，观察动物的情况，筛选出模型组动物，并称重标记，分好组别，为后续实验做准备。 四、11月8-15号给豚鼠灌胃。 五、11月16-22号用生物采集信号器测定豚鼠的哮喘潜伏期和哮喘持续时间并研究其量效关系。采用心脏取血，经离心后取得血清，于-20度的冰箱保存。 六、11月23-26号，用相关软件统计和处理数据，写成文章 实验方案 麻杏石甘汤平喘作用的量效关系实验研究 摘要 目的： 麻杏石甘汤混料设计剂量对豚鼠的平喘功效进行实验研究，探讨其相应的量效关系及可能的作用机制，为临床规范其合理用量提供客观科学的依据；并用生物信号采集系统测其哮喘潜伏期和哮喘持续时间来研究其量效关系。 方法： 采用磷酸组胺和乙酰胆碱的等体积混合液进行喷雾造模，然后设为正常组、模型对照组、阳性对照组、麻杏石甘汤剂量1-13共16个组。除正常组和模型对照组灌胃生理盐水外，13个剂量组灌胃给药麻杏石甘汤，末次给药后1小时测定豚鼠的引喘潜伏期和哮喘持续时间，统计结果并比较差异，做出量效关系图； 1．实验方法和给药 采用随机数字法将160只豚鼠随机分为16组，模型组、空白组、阳性组、麻杏石甘汤给药组（1-13剂量），10只/组，标记并称重，以上各组豚鼠灌胃量为10ml/kg,其中模型组和空白组灌胃等量NS，每日一次，共8天。表中为麻杏石甘汤给药混料设计剂量表，其浓度为1g/ml的生药。 剂量 麻黄 杏仁 甘草 石膏 总量 N1 16.17829 129.1417 61.80122 8.828746 215.95 N2 87.93148 101.8868 11.97702 14.15465 215.95 N3 107.975 11.90354 20.01489 76.05657 215.95 N4 9.401256 80.06399 36.89139 89.59337 215.95 N5 3.041954 33.71922 97.06061 82.12821 215.95 N6 60.2231 84.64762 8.88491 62.19437 215.95 N7 72.7371 29.99316 108.5022 4.717489 215.95 N8 31.31535 11.92475 136.7287 35.98123 215.95 N9 39.91572 80.9649 59.41836 35.65102 215.95 N10 23.44925 50.82404 5.903197 135.7735 215.95 N11 49.45021 3.505651 61.1228 101.8713 215.95 N12 141.0843 24.18138 35.90138 14.78292 215.95 N13（原方） 30.85 30.85 30.85 123.4 215.95 2．引喘潜伏期测定 豚鼠连续给药8天，空白组和模型组灌胃相应体积的生理盐水溶液，麻杏石甘汤给药组按表中的1-13剂量分别灌胃相应药液（10ml/kg）。试验前豚鼠禁食12h，不禁水。于末次给药后1h将豚鼠胸廓绑定于连有生物信号采集系统的呼吸换能器，动物置于连有超声雾化器的玻璃钟罩内，以1%氯化乙酰胆碱+0.2%磷酸组胺的等体积混合液喷雾8秒，流速1.6ml/min，封闭时间2min,生物信号采集系统同步记录呼吸波，波形结合肉眼观察开始出现哮喘症状的时间（以首次抽搐为准）并记录数据，即引喘潜伏期。 3．哮喘持续时间测定 豚鼠连续给药8天，空白组和模型组灌胃相应体积的生理盐水溶液，麻杏石甘汤给药组按表4中的1-9剂量分别灌胃相应药液（10ml/kg）。试验前豚鼠禁食12h，不禁水。于末次给药后1h将豚鼠胸廓绑定于连有生物信号采集系统的呼吸换能器，动物置于连有超声雾化器的玻璃钟罩内，以1%氯化乙酰胆碱+0.2%磷酸组胺的等体积混合液喷雾8秒，流速1.6ml/min，生物信号采集系统持续记录30分钟内的哮喘呼吸波，观察喷雾开始至呼吸波形恢复正常的一段时间（以末次抽搐为准）作为哮喘持续时间（超过观察期的以30分钟计）。 4．动物具体标记方法 4.1动物标记方法 总共160只豚鼠根据哮喘模型的筛选，从中筛选出模型组动物10只。然后把全部动物随机分成十个组，第一组为模型组、阳性组、空白组、剂量1-13的1号动物，第二组为模型组、阳性组、空白组、剂量1-13的2号动物，以此类推，第十个组为模型组、阳性组、空白组、剂量1-13的10号动物。 1：笼子外贴上标签：标记为1-10号组。 2：动物的