IRES特异性抑制性RNA阻断丙型肝炎病毒基因表达地研究.pdfVIP

92．IRES特异性抑制性RNA阻断丙型肝炎病毒基因表达的研究 第二军医大学长海医院感染科(200433)梁雪松 HCV感染呈全球性分布，以不发达国家感染率为高，我国约为3％，该病原常可引起持续感染，且 与肝硬化及肝癌发生率明显相关，是当前严重危害人类健康的重要传染病。由于其体外培养尚未成功， 至今尚无满意的感染模型，因而极大的限制了HCV的研究及丙型肝炎的防治工作。迄今为止尚无有效 的治疗策略。所以，寻找新的抗病毒策略，预防和清除HCV持续感染很有必要。基因治疗作为一种新 型的治疗策略对HCV感染防治具有重要的意义，近年来得到国内外学者广泛认同的策略主要包括反义 核酸策略、核酶策略、细胞内干扰性多肽或蛋白策略、抑制性RNA策略等。 表达具有较强的抑制作用。为此，探讨IRNA在体内外对HCV基因表达的抑制作用，对HCV感染的防 治具有重要的现实意义。 本研究应用分子克隆技术，构建了将具自剪切作用的顺式核酶序列引入IRNA序列两端可保持m— NA一级和二级结构完整性的原核及真核表达体，并以此为基础对IRNA在体外无细胞翻译体系中对 HCV mEs介导非帽结构依赖性蛋白翻译的抑制作用进行了研究。此外，应用脂质体细胞转染方法及新 霉素抗性筛选建立了表达UlNA及mIRNA的HHCC细胞，并应用相同方