MGB(Minor+Groove+Binder)探针实时定量PCR检测致病性嗜水气单胞菌.pdfVIP

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2017-08-19 发布于安徽
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MGB(Minor+Groove+Binder)探针实时定量PCR检测致病性嗜水气单胞菌.pdf

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水产健康养殖与质量安全研讨会论文集 Groove MGB(Minor 气单胞菌高建忠魏雪童琰 (上海海洋大学水产与生命学院，上海201306) 最低细菌数为1．25x100CFu／止，：试验中嗜水气单胞菌柃测结果均为阳性，而非嗜水气单胞菌检测结果均为阴性；重复性实验中，批问差异小于5％，批内差异小于3％。实验结果娃示荧光定量PCR方法可对敛病性嗜水气单胞菌株进行快速鉴定。该方法的建立为致病性嗜水气单胞菌的检测提供了一种简便、快速的途径，是一种比较实用的致病性嗜水气单胞菌的检测方法。关键词：嗜水气单胞菌；荧光定量PCR；MGB探针；气溶素基因；检测 of PCRforDetection Real—time ofAeromonas Application MGBFluorescenceProbe hydrophilabyUsing GAO Xue Yan，WEI Jianzhong，TONG ofFisheriesandLife Ocean 201 Science，Shanghai (College University，Shanghai306) Abstraet：Areal．timePCR．basedon and Taqmanhybridizationprobestechnology,weredeveloped todetect Aeromonas of andone were applied pathogenic hydrophila．Onepairsprimer probesdesigned fordetection was with aerolysingenes．Theaerolysinprobe5’endlabeledFAMand3’endlabeledwith detectionlimitsofthe were1．25x sensitivity 10”CFU／BL：the Taqman-MGB．The assays qualitative consensusPCR indicateda11Aeromonas werefound anddidnotdetectDNA assay hydrophila positive fromnon-Aeromonasisolates．Inthe ofvariation hydrophila duplicatedexperiment．coe硒cients and overthe oftheMGB werelowerthan3％and intra-assayinter-assaydynamicrange probeassays resultsshowthatthisreal-