乙醇冷冻法纯化分离磷脂酰胆碱研究.pdfVIP

第十八届学术年会暨产品展示会 论 文 选 集 201 乙醇冷冻法纯化分离磷脂酰胆碱的研究 王成涛李桂华方芳 (河南工业大学粮油食品学院，河南郑州，450052) 摘要：本文以大豆粉末磷脂为原料．采用乙醇混合提取和乙醇冷冻纯化两个步骤提取纯化磷腊 酰胆碱：重点探讨了乙醇冷冻纯化步骤的工艺条件，考察了冷冻时间、冷冻温度、料液比、乙醇浓度 等因素对乙醇冷冻纯化效果的影响。并在单因素试验基础上进行了b(3‘)正交试验，通过极差分析， 影响磷脂酰胆碱纯度和得率综合指标的因素主次顺序为：乙醇浓度料液比冷冻温度冷冻时间， 确定的最佳冷冻纯化工艺为：冷冻时间6h，冷冻温度-12。(2，料液比1：8，乙醇浓度97．5％，在此条件 下纯化分离．试样中磷脂酰胆碱舍量由4．7．8％提高到70．5％、得率为81．2％。 关键词：磷脂酰胆碱；乙醇；纯化；高效液相色谱 磷脂亦称磷酸甘油酯．是动植物中细胞膜、核 脂酰胆碱纯度可达48％。再采用柱层析分离纯化制备 膜、质体膜的基本成分，是生命的基础物质。主要从 高纯度磷脂酰胆碱。G．Began[41等人利用超临界二 大豆或蛋黄中提取，由磷脂酰胆碱(PC)。磷脂酰乙氧化碳制备脱油磷脂，后用乙醇提取磷脂酰胆碱，考 察了在40℃下压力对萃取效果的影响，随着压力的升 醇胺(rE)，磷脂酸(PA)，溶血性磷脂酸胆碱 (LPC)、肌醇磷脂(PI)及糖酯等组成的混合物。高。产品中磷脂酰胆碱的纯度从55％提高到70％。膜 20世纪80年代。科学界揭示，磷脂酰胆碱中胆分离法限于现有膜尚不能完全分离相对分子量相近的 碱成分可作为介质、信使和局部激素等系列小分子信 组分，尚在试验室研究阶段。 息活性物质的前体，如胆碱与体内代谢的乙酰结合生 为探索乙醇提取物中磷脂酰胆碱与其他磷脂在低 成的乙酰胆碱是神经传递质。磷脂酰胆碱还能促进脂 温条件下的纯化分离工艺技术．试验研究了以粉末磷 蛋白合成、再生，保护肝细胞的线粒体(、微粒体等 脂为原料。采用乙醇萃取、低温冷冻法纯化分离磷脂 膜免受损伤，及改善脂质代谢异常、治疗动脉粥样硬 酰胆碱的工艺技术方法。重点探讨了冷冻时间、冷冻 化、老年痴呆症、脂肪肝、神经衰弱和营养不良等疾 温度、料液比、乙醇浓度等因素对磷脂酰胆碱冷冻纯 病。引起世界各国重视磷脂酰胆碱的开发利用。 化效果的影响。 近年来。国内外有关磷脂酰胆碱的制备多有报 1材料与方法 道：主要有溶剂萃取法、超临界流体萃取法、层析分 1．1原料 Sosada【1] 离法及膜分离法等方法[141。1993年Marian 以粉末磷脂为原料，研究了萃取时问、萃取温度、料 粉末磷脂：郑州四维磷脂技术有限公司提供，理 液比、乙醇浓度等对乙醇混合提取磷脂酰胆碱效果的 化指标见表l。 表1 大豆粉末磷脂的理化指标测定结果 影响．得到的最佳提取条件为温度30℃、时间 10rain、料液比1：30(w／V)乙醇浓度100％，所得磷 项目酸微芽’镒孑焉筹譬孑麓 结果 18 1．7 96．7 0．01 1．1 ．竺羹霎圣二三慧。2：=二_男，河南平顶山人’在读硕 1．2试剂与仪器装置………“1—‘ 一 士。研究方向为天然磷脂制取与加工。 通讯作者：李桂华(195p)，男，河南信阳人，教授，研究1．2．1 试剂