应用成像毛细管等点聚焦技术分析重组人促红素研究.pdfVIP

应用成像毛细管等点聚焦技术分析重组人促红素的研究* 王丽，周勇**, 王军志** （中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室，北京 100050） 摘要 目的：建立成像毛细管等电聚焦分析重组人促红素的异构体和等电点的方 法。方法：应用优化的成像毛细管等点聚焦电泳技术对重组人促红素成像毛细管 等点聚焦分析。结果：采用优化的成像毛细管等电聚焦电泳技术，可较好地分 析重组人促红素的异构体和等电点，该方法稳定可靠，重复性好。结论： 本研 究建立了简便、快速、有效的重组人促红素异构体检测分析手段。 关键词：重组人促红素；成像毛细管等点聚焦；等电点 中图分类号：R917 文献识别码： 文章编号： Analysis of Recombinant Human Erythropoietin by imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis Wang Li, Zhou Yong* （National Institutes for Food and Drug Control, beijing 100050 ） Abstract ：Objective : To develop animaging capillary isoelectric focusing electriphoresis method for analysis of isomer and isoelectric point of recombinant human erythropoietin.Methods : Recombinant human erythropoietin was analyzed for isomers and isoelectric points by imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis.Results :The isoelectric points and isomers of recombinant human erythropoietin was analyzed by the developed imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis.The method was reliable ,rapid,and showed high resolution and reproducibility. Conclusion:Imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis method may b used for analysis of isomer and electric point of recombinant human erythropoietin,which provides an effective tool for quality control of recombinant human erythropoietin. Key word: capillary isoelectric focusing ；glycoprotein ；electric point 重组人促红素（rHuEPO ）是利用基因工程技术，将人的EPO 基因转入哺乳 动物细胞内，高效表达的能刺激红细胞生成的糖蛋白激素，主要用于治疗慢性肾 功能衰竭和癌症化疗产生的贫血[1-4] 。rHuEPO 由 165 个氨基酸组成，肽链上有 3 个 N-连接的和 1 个 O 连接的糖基化位点[5] 。完整的rHuEPO 分子糖含量高达分 子量的 40 ％，rHuEPO 的生物活性不仅与氨基酸序列有相关性，而且与蛋白的糖 基化程度密切相关。糖链的完整性直接决定 rHuEPO 在体内的稳定性和活性，特 [6] 别是糖链末端的唾液酸残基对 rHuEPO 的体内生物学至关重要 。这是因为糖基 末端无唾液酸的 EPO 分子暴露出半乳糖，会被肝脏中半乳糖受体结合而迅速清 ________________________ *国家“重大新药创制”科技重大