固本健脑法对MCI大鼠学习记忆能力及海马Caveolin-1的影响.pdf

中文摘要 目的 从中医学对老年记忆的生理病理认识探讨老年人轻度认知障碍的发 病机理为脾肾亏虚，脑失所养。遵循中医“虚则补之”“未病先防，既病 防变的治疗原则，提出固本健脑法治疗MCl。用东莨菪碱、NaNO：、40％ 乙醇腹腔注射制备学习记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍小鼠模型，观 察固本健脑法对学习记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍模型小鼠学习记 忆能力的影响，探讨固本健脑法对学习记忆获得、巩固、再现各反面障碍 的治疗效果；用D-gal与NaNO：腹腔注射制备MCI大鼠模型，通过观察固 本健脑法对MCl模型大鼠学习记忆能力、海马组织病理形态、Cav-I、Syn、 作用机理，为中医药治疗中老年人轻度认知障碍提供理论和实验依据。 方法 I．将3月龄昆明种小鼠90只，随机分成3组，每组又分为3个亚组， o只；固本健脑液组(B 即正常组(A组)30只，其中A1、A2、A3每组各1 组)30只，其中B1、B2、B3每组各1o只；模型组(c组)30只，其中c1、 C2、C3各1 0ml／kg·dq o只。适应性喂养一周后，各组小鼠均每日1次按1 的剂量灌胃，正常组和模型组小鼠灌服o．9％的生理盐水，固本健脑液组 制备记忆获得障碍模型，B2、c2组腹腔注射亚硝酸钠制备记忆巩固障碍 组腹腔注射等容量生理盐水，用跳台法实验观察实验小鼠的学习记忆能 为。 s水迷宫法筛选出记忆能力相当的84只3月龄sD大鼠 2．将用Morri 随机分为6组，即正常组、模型组、脑复康治疗组(简称脑康组)、固本 健脑液低剂量组(简称固低组)、固本健脑液中剂量组(简称固中组)、固 本健脑液高剂量组(简称固高组)，每组14只。各组大鼠适应性喂养一周 后，每日上午正常组大鼠腹腔注射生理盐水，固高组、固中组、固低组、 脑康组、模型组大鼠腹腔注射D-gai和NaNOz，连续40天以复制MCI模型， 从造模13天起每日下午加以正常组、模型组大鼠灌服生理盐水，固高组、 固中组、固低组、脑康组大鼠分别灌服相应药物进行预防，连续28天。 40天后用水迷宫行为学试验观察各组大鼠学习记忆能力，光镜、电镜下 观察各组大鼠海马组织病理形态学改变，免疫组化法检测各组大鼠海马组 SNAP-25的表达，免疫印迹法检测各组大鼠血清Cav-I、Syn的表达。 结果 1．与学习记忆获得障碍、巩固障碍、再现障碍模型各组小鼠相比较， 正常组潜伏期明显高于各模型组(尸0．01)、5分钟内错误次数明显低于 各模型组(尸0．01)；固本健脑液治疗组潜伏期高于各模型组(尸O．05)、 5分钟内错误次数低于各模型组(尸o．05)。 2．与正常组相比，固高组、固中组、固低组、脑康组、模型组大鼠 精神倦怠，均不同程度的表现出饮水量、进食量、活动量减少，皮毛干枯、 稀疏、脱落。 3．Morri s水迷宫行为学实验，定位航行实验中各组大鼠的平均潜伏 期、平台所在象限百分比，空间探索实验中各组大鼠的平均潜伏期、跨越 原平台位置的次数、平台所在象限百分比的结果，正常组、固高组、固中 组与模型组比较均有显著性差异(尸0．01)，固低组、脑康组与模型组比 较均有差异(尸o．05)，固高组、固中组与脑康组比较均有差异(尸0．05)， 固低组与脑康组比较没有统计学意义(尸0．05)。 4．光镜、电镜病理形态上观察，正常组主要表现为海马神经元细胞 饱满，细胞层数及细胞数目较多，大小一致，排列紧密、整齐，胞膜完整， 突触结构丰富；模型组大鼠海马神经细胞数目明显减少，细胞排列混乱， 层数减少甚至单层，胞膜、核膜界限不清，胞核空泡变性，核仁变小、裂 解，胞质增多，突触数目明显减少；各治疗组介于正常组和模型组之间， 与模型组相比均有不同程度的改善，以固高组、固中组的改善最为显著。 5．免疫组化检测各组大鼠海马组织Cav-1蛋白的表达，结果正常组 大鼠海马内Cav一1蛋白阳性免疫产物表现最多，模型组最少，各治疗组介 于正常和模型组之间，与模型组相比均有不同程度的改善，以固高组、固 中组的改善最为显著。 表达，结果二者在各组大鼠海马内的表达具有高度的正相关性。正常组大 比较均有显著性差异(尸o．01)；固高组、固中