革皮氏海参总皂苷促进小鼠骨髓造血机能作用及机制与研究.pdfVIP

革皮氏海参总皂苷促进小鼠骨髓造血机能的作用及其机制的研究 革皮氏海参总皂苷促进小鼠骨髓造血机能的作用及其机制 的研究 摘 要 海参皂苷是海参的主要次生代谢产物，是海参体内特有的一类三萜类化合 物。本实验通过急性毒性、30d喂养实验研究革皮氏海参总皂苷对小鼠或大鼠的 一般毒性以及长期摄入对生长发育产生的有害效应，并检测其毒作用性质和靶器 官，观察长期摄入对机体造成的危害。在确定海参皂苷的毒作用性质及半数致死 lethal 量(mediandose，LDs0)的基础上，在其安全性应用范围内来研究海参皂苷 对小鼠骨髓造血机能的促进作用。本实验采用连续3次腹腔注射环磷酰胺 调制的革皮氏海参总皂苷灌胃模型小鼠，研究其对小鼠骨髓造血功能的影响，并 对其作用机理进行了较系统和深入地研究。主要研究结果如下： 革皮氏海参总皂苷对小鼠的LDso-雄性为1．089／1【g，雌性为1．1g／l(g。一次 urea 性灌胃海参皂苷，小鼠血清中尿素氮(serum Cr)、谷草转氨酶(aspartate 肾脏和肝脏功能无明显损伤效应。30d喂养实验显示，海参皂苷对大鼠血液生化 学和尿液生化学指标均无显著影响，说明其对大鼠肝脏，肾脏和心血管等器官无 blood 明显毒性损伤。另外，海参皂苷明显促进雄性大鼠外周血中白细胞(white cell，wac)数和血小板数(plastocyte，aN)增加。 采用细胞培养和组织培养方法，研究海参皂苷对骨髓造血功能的影响。结果 marrow 量以及网织红细胞(reticulocyte，rU三T)数量，促进骨髓有核细胞(bone nucleated stem cell，BMNC)分裂增殖，刺激造血干细胞(hemopoieticcell，HSC) 的增殖与分化，对体外培养粒一单系(PO．01)、红系(尸0．05)和巨核系祖细胞 (尸O．01)集落生成有明显的促进作用；同时海参皂苷刺激肺、脾脏和腹腔巨噬细 胞等组织中分泌多种造血生长因子，促进小鼠骨髓造血。 chain 利用流式细胞术、RT-PCR(reverse reaction)法检 transcription．polymerase 革皮氏海参总皂苷促进小鼠骨髓造血机能的作用及其机制的研究 测海参总皂苷对小鼠骨髓细胞细胞周期分布和细胞凋亡的影响。结果显示，海参 B1 皂苷促进骨髓细胞从S期进入到G2／M期，同时促进细胞G2／M期调控点cyclin 基因的表达，促进细胞有丝分裂；提高抑制凋亡基因bcl．2和bcl．xlmRNA的表 达(P．o．01，P0．01)，抑制细胞凋亡。说明海参皂苷可通过调整细胞周期、促进 细胞有丝分裂、抑制细胞凋亡，来促进小鼠骨髓造血功能。 通过RT-PCR法检测小鼠骨髓细胞造血生长因子粒细胞巨噬细胞刺激因子 colony-stimulatingfactor，GM-CSF)、促红细胞生成素受 (granulocyre-macrophage 体(erythropoietin 和TPO mRNA(P0．01)的表达，推测海参皂苷通过促进小鼠骨髓细胞合成和分 刺激骨髓红系祖细胞、粒．单系祖细胞或巨核系祖细胞的增殖和分化，达到促进 造血的功能。 本论文首次对海参皂苷的安全性评价进行分析，为其以后在临床上的应用以 及营养品和保健品等领域提供一定的科学依据。在其安全性应用范围内研究海参 皂苷促进小鼠骨髓造血功能的作用，并对其机制进行探讨