铜离子选择电极.pdfVIP

第34 卷 分析化学 （FENXI HUAXUE ） 研究简报 第5 期 2006 年5 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 691 ～ 694 铜离子选择性微电极用于银杏根尖离子流的时空监测 1 1 2 # 方成 李建平 顾海宁 1 （桂林工学院材料与化学工程系，桂林54 1004 ） 2 （浙江大学化学系，杭州310028 ） 摘 要 通过在超细铜丝尖端（直径约为16 µm ）电沉积硒化铜薄膜的方法制备了全固型铜离子选择性微电 极，研究了它对铜离子的能斯特响应，包括选择性、检出限和响应时间等参数；使用该电极检测到银杏（ Ging- ko ）根尖表面的铜离子时空流，并首次发现Gingko 根细胞对Cu2 + 摄取具有振荡性。 关键词 微电极，硒化铜，离子流，银杏 1 引 言 生物的生长和适应环境的能力受制于它们对营养物质摄取和代谢废物排放过程的控制能力。细胞 膜传输系统是以上两个过程的中心环节，植物细胞表面离子流［1］是这种过程的一种具体体现。目前， 研究细胞膜离子传输机理的几种方法各具特色：放射标记法方法简便，但时间分辨力差［2 ］，限制了其在 细胞快速应答过程机制研究中的应用；膜片钳技术是研究离子传输过程的经典方法，但一般仅适用于巨 ［3 ］ 型的球形细胞体 ；近年来荧光显微成像技术日益普及，但是荧光染料的种类有限，目前能测定的离子 仅限于 + 2 + ［4 ］ ［5 ］ H 和Ca ；液膜离子选择电极曾用于生物体系中离子 的测定，但由于其制备复杂，噪声大， ［6 ］ 响应慢，敏感膜易被毒化，且难于制成微电极的特点 ，在细胞膜传输机理研究方面极少使用。 铜是公认的植物必需的7 种微量元素之一，是多酚氧化酶、抗坏血酸氧化酶、漆酶和细胞色素氧化 酶的组成成分；也是光合电子传递链中的电子传递体质蓝素的组成成分［7 ］。铜主要是以离子态通过交 换吸附到根细胞表面，然后通过主动运输或被动运输进入细胞内。植物吸收离子的主要部位是位于根 ［8 ］ 2 + 2 + 的成熟区 。监测根尖的Cu 流轮廓将有助于了解根吸收Cu 的生理过程。本实验用电沉积硒化铜 薄膜的方法［9 ］，成功地研制了全固型Cu2 + 选择性微电极。该电极尺寸小，响应范围宽、响应时间短。使 用该电极对银杏根尖Cu2 + 释放进行检测，首次观测到Cu2 + 的时空流量及其振荡现象。 2 实验部分 2 . 1 仪器与试剂 微电极定位和电位测量在CHI900A 型扫描电化学显微镜（CH Instruments Inc. ，Austin ，TX ）上进行； 参比电极为Ag/ AgCl 电极；XS-212-103 型生物显微镜，自配数码相机；JSM-6460 型电子显微镜（日本电 子株式会社）；PHI 5500 ESCA 系统（美国Perkin Elmer 公司）。Cu2 + 标准液：50 µmol/ L 。实验中使用的 其他试剂均用分析纯试剂配制，实验用水为去离子水。所有测定均在室温（24 ～ 26℃ ）下进行。 2. 2 全固型Cu2 + 选择性微电极制作 如图1 所示，将直径50