基质固相分散气相色谱-质谱法测定食品中丙烯酰胺方法地研究.pdfVIP

第二届全国试剂与戌用技术交流会 基质固相分散气相色谱一质谱法测定 食品中丙烯酰胺方法的研究 贾斌刘继红冯书惠王会峰 (农业部农产品质量监督检验测试中心(郑州) 河南省郑州市450002) 摘要：建立了食品中丙烯酰胺的基质固相分散法样品前处理，溴衍生化后气相色 谱一质谱(Gc—Ms)测定的检测方法。样品采用活性炭基质固相分散技术进行样品前 处理、用溴衍生化，晟后用Gc—MS选择离子对其中的丙烯酰胺进行定性定量。该方 法的检出限为3Pg／垤，回收率为91．2％～103％，变异系数为5，9％。利用本方法 kg。 关键词：丙烯酰胺基质固相分散气相色谱一质谱 丙烯酰胺(图1)，CAS号为79-06—1，一种已知的神经毒素，是国际肿瘤研究 机构认定的2A类致癌物。2002年瑞典科学家的研究发现食品中的氨基酸和糖一起 加热后发生MMllard反应可生成丙烯酰胺，因而在高温加热的植物源性食品中普 遍含有30～2000p g／kg的丙烯酰胺，远远大于水中的残留。 H、 骨 H，、八NH2 H 图1丙烯酰胺结构式，71．089／mol 丙烯酰胺的问题凸现后，各国都在加紧研究建立食品中丙烯酰胺的分析方法。 目前国际上分析丙烯酰胺的方法主要有气相色谱一质谱法(GC-MS)和液相色谱一质 谱／质谱法(LC-MS／Ms)“…。本研究建立了活性炭基质固相分散法净化样品，溴衍生 化，气相色谱一质谱法测定食品中丙烯酰胺的方法，本方法中基质固相分散技术净 化样品操作简便、快速，气相色谱一质谱法测定检出限低、定性准确，适合于食品 市场上大量样品的快速检测。本文利用该方法对市场上某些食品中丙烯酰胺的含 量进行了分析测定。 一实验部分 1．1 仪器与试剂 QP 日本岛津Gc 5000气相色谱一质谱仪(配毛DB一5毛细管气相色谱柱，30m ．132． 璺三旦全粤苎型量查旦丝查奎垫全 X0．25IIlⅡl×0．25um)，活性炭(用前活化)，环己烷(色谱纯)，溴水．氢溴酸， 硫代硫酸钠。 所用试剂未经说明，均为分析纯，试剂空白应没有杂质干扰。 丙烯酰胺标准溶液：精确称取适量的丙烯酰胺标准品，用水溶解，配制成质 量浓度为Img／mL雕J标准储备溶液。根据需要用水稀释成适宜浓度的标准工作溶液。 1．2 实验步骤 1．2．1样品提取和净化 准确称取已粉碎的样品29于250m1烧杯中，加环己烷0．5mL充分混匀，再加入29 活性炭，用玻棒将活性炭与样品液充分搅拌混合均匀为基质，取--5ml注射器，于 注射器底部垫一圆滤纸片，将基质填入后在注射器顶部再加一圆滤纸片以防基质 流出。然后用注射器塞加压至最后体积)b4ml，得到基质柱。首先用15mi环己烷淋 洗基质柱，柱内剩余的环己烷用加压法从柱上除去，然后用15ml水洗脱丙烯酰胺， 收集洗脱液留作衍生用。 1．2．2溴衍生化 mL衍生， 在样品溶液中加入溴化钾7．59，用氢溴酸调PH值为1～3，再加溴水8 在4。C下过夜。滴加硫代硫酸钠溶液(0．2mol／L)至黄色消失。将溶液转移到分 液漏斗中，加乙酸乙酯40IflL，振荡，静置分层，弃去水层。乙酸乙酯层过无水硫 酸钠后，浓缩至1mL，待测。吸取适量标准储备溶液与样品处理液同时进行溴衍 生化。 i．2．3GC-MS测定条件 载气：高纯氦气，流速1．OmL／min：进样口温度：250℃；进样方式：无分流进样： ℃；电子能量：70eV。选择离子：丙烯酰胺衍生物的特征碎片离子：m／z152，150， 108，以m／z150定量。 =结果与讨论 2．1净化条件选择 基质固相分散(MSPD)是一种基于固相萃取(SPE)的样品前处理技术，与SPE 技术一样可以避免液液分配中出现的乳化现象，减小有机溶剂用量，缩短分析时 间，而且在操作上比SPE