脑胶质瘤中p33蛋白表达及其和细胞凋亡和增殖关系的研究.pdfVIP

中国·唐山 论文汇编·论文及摘要 脑胶质瘤中p33蛋白表达及其与细胞凋亡 和增殖关系的研究 姚志刚1焦保华2戴缤3孙晓立1 1石家庄市第三医院神经外科2河北医科大学第二医院神经外科 3北京市世纪坛医院神经外科 【摘要】目的：检测p33…蛋白在脑胶质瘤中的表达，探讨其与肿瘤细胞增殖、凋亡及肿瘤恶性程度的关 系。 细胞凋亡检测，实验数据用SPSS10．0软件包进行统计。结果：50例脑胶质瘤中p33鹏1蛋白表达的总阳性 率为90％(28／50)，不同病理级别肿瘤间p33“1的阳性表达率差异均无统计学意义(乃O．05)，但其表达水 亡，抑制细胞过度增殖，与胶质瘤恶性程度密切相关。检测其表达水平的变化对胶质瘤的诊断、治疗及判 断预后方面均有重要指导意义。 【关键词】胶质瘸p33矾01凋亡增殖 长期以来，关于胶质细胞瘤的诊治一直困扰着神经外科领域。随着分子生物学研究的发展，胶质细胞 瘤被认为是一类涉及多种基因突变的疾病，体内多种癌基因激活和抑癌基因失活与胶质瘤的发生有关。本 研究采用免疫组化染色和原位细胞凋亡检测等方法评价了胶质瘤中p33啪1蛋白的表达及其对肿瘤细胞增 殖、凋亡的潜在影响，明确其与胶质瘤的病理分级的关系，揭示其生物学行为，为胶质瘤的诊断及预后估 计提供依据。 1材料和方法 1．1患者及组织标本 选取2001年2004年于河北医科大学第二附属医院神经外科行手术切除并经病理诊断的胶质瘤存档 分类和分级，其中I级10例；II级16例；Ⅲ级18例；Ⅳ级6例。另取8例取自同期因急性颅脑损伤行 内减压手术的正常脑组织作为对照，其中男6例，女2例。全部标本进行免疫组织化学染色。 1．2 免疫组织化学染色法(s．P)检测p33Ⅸa的表达及细胞增殖活性 鼠抗人PCNA为美国Dako公司产品：羊抗人p33玳01单抗由瑞典格尔平大学病理中心孙晓峰教授惠赠， S-P试剂盒及DAB染色剂等均购自北京中山生物技术有限公司。具体操作按说明书进行。用PBS代替一 抗作阴性对照，PCNA及p33Ⅲ01分别以已知阳性标本乳腺癌及口腔组织做阳性对照。 1．3末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(删EL)检测细胞凋亡 n腻EL试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司，检测程序按试剂盒说明书进行。不加TdT做阴性 对照，已知凋亡细胞阳性的大鼠小肠组织作为阳性对照。 247 中华医学会河北省神经外科分会 中国·唐山 1．4结果判断标准 p33啪1蛋白表达阳性细胞是胞质呈棕黄色，少量的也有胞核表达，阳性细胞成不均散分布。表达结果 以高倍显微镜(x400)下阳性细胞数表示。每张切片随机选择5个以上高倍视野，镜下视野清晰，无坏死、 index，LIt 出血，计算每一标本的阳性染色的肿瘤细胞与所测肿瘤细胞的比例，作为标记指数(Labelling ％)评价表达水平。 凋亡细胞核和PCNA阳性肿瘤细胞核均呈棕黄色。在400倍显微镜下进行观察，每个标本组织片随机 观察5个视野。分别计算每一标本的阳性染色的肿瘤细胞与所测肿瘤细胞的比例，作为凋亡指数(舢)和 增殖指数(PI)。 1．5统计方法 本文所有数据用SPSS10．0软件包完成统计。计量资料采用均数士标准差表示。对结果采用方差分析及 Pearson相关。检验标准采用po．05。 2结果 2．1 p331№1蛋白的表达 异均无统计学意义(尸o．05)，但其表达水平(L1)存在非常显著性差异，即随着胶质瘤的恶性度增高，其 表达水平下降(F=40．39，P0．01；表1)。 2．2 p33州G1蛋白表达与肿瘤细胞凋亡的关系 线性相关(，=0．432，P0．01)。 2．3 p33眦1蛋白表达与肿瘤细胞增殖的关系 相关(r=一O．335，P0．01)。 3讨论 人脑胶质细胞瘤同其他许多恶性肿瘤一样是癌基因激活