鸡传染性腺胃炎病原的分离与鉴定.pdfVIP

动物医学进展 ,2005 ,26 (5) :102104 Pro gre ss in V et erinary Medicine 鸡传染性腺胃炎病原的分离与鉴定 1 2 2 2 2 1 褚艳丽 ,张秀美 ,胡北侠 ,黄艳艳 ,郭立辉 ,刘思当 ( 1. 山东农业大学动物科技学院 , 山东泰安 27 10 18 ;2 . 山东省农业科学院畜牧研究所 ,山东济南 250022) 中图分类号 :S852 . 659 . 6 文献标识码 :A 文章编号 (2005) 050 10203 摘 　要 : 自泰安地区的腺 胃炎病鸡群中分离 1. 2 . 2 　病料的处理 　取上述细菌检查阴性的病鸡腺 到 TA 毒株 ,在 SP F 鸡胚稳定传至第 6 代 ,病 胃病料 ,置研钵中剪碎 ,加适量生理盐水稀释 ,将组织 毒具有致鸡胚规律性死亡和典型致胚胎病变 捣成匀浆 ,然后加入抑菌药物 ,将匀浆液反复冻融 3 特征 。TA 株感染鸡胚尿囊液提纯的病毒经 次 , 以2 000 r/ min 离心 15 min ,然后以6 000 r/ min 离 负染后电镜观察 : 病毒粒子大小为 80 nm ～ 心 10 min ,取上清液分装后置 - 20 ℃保存备用 。 160 nm ,有囊膜 ,表面有纤突 ,呈典型冠状病 1. 2 . 3 　鸡胚传代 　取上述处理好的样品 ,分别接种 10 枚 10 日龄健康 SPF 鸡胚 ,每胚绒毛尿囊腔接种 毒形态 。病毒无直接血凝性 ,但经 10 g/ L 胰 0 . 2 mL ,弃去 24 h 内死亡胚 ,连续观察 5 d ,活胚置 酶处理后能凝集鸡红细胞 。对病毒进行 了 4 ℃冰箱过夜后 ,分别收取死胚和活胚的尿囊液 ,将 EL D50 测定 、对 NDV 的干扰试验和致病性试 以上混合液用灭菌生理盐水作 1 ∶10 稀释 ,经细菌 验 。结果表明 ,病毒均呈现冠状病毒的特性 培养为阴性后再接种下一代 SPF 鸡胚 ,并连续盲传 和与自然病例相似的病理症状 。 至第 6 代 , 同时检查各胚的发育和病变情况 。 关键词 :鸡 ;传染性腺胃炎 ;冠状病毒 1. 3 　病毒特性的鉴定 自1996 年以来 ,在江苏 、山东和浙江等许多省 1. 3 . 1 　 电镜 观 察 　取 第 6 代 鸡 胚 尿 囊 液 IB 免疫鸡群 中发生 了与腺 胃病 变 有 关 的传 染 [ 12 ] 4 000 r/ min离心 30 min ,取上清液 8 000 r/ min 离 病 ,发病 日龄在 2 1 日龄～90 日龄左右 ,病鸡极度 心30 min ,上清液经 24 000 r/ min 离心 2 h ,沉淀用 消瘦 、呼吸困难 、拉稀并发生死亡 , 以腺 胃肿大如球 PB S 悬浮 ,醋酸铀负染后在电子显微镜上观察病毒 状 ,腺胃